¿Qué es la Prueba de la Ureasa ? Principio, Composición, Interpretación de los Resultados

La prueba de la ureasa es un procedimiento que se utiliza para determinar la capacidad del organismo para dividir la urea mediante la producción de una enzima ureasa.

Imagen 1: Se colocaron dos tubos de ensayo para la prueba de ureasa; el tubo de ensayo rosado es positivo para ureasa, mientras que el tubo de ensayo naranja es negativo.
Fuente de Imagen: microbeonline.com

Imagen 2: Cuatro tubos de ensayo de ensayo de ureasa con diversos grados de resultados.
Fuente de Imagen: biologypractical.com

Principio

La descarboxilación de aminoácidos conduce a la producción de urea. Una vez que la urea sufre hidrólisis, produce amoníaco y dióxido de carbono. La urea es ácida, pero la formación de amoníaco convierte el medio en alcalino.

El cambio en el pH se indica por los cambios de color de naranja claro a magenta. Por lo tanto, un organismo que da positivo para ureasa hace que el medio sea rosado en 24 horas. ^{(1, 2, 3 y 4)}

Composicion

• Medio de agar o caldo
• Rojo fenólico como indicador
• Urea
• Cloruro de sodio
• Peptona
• Dextrosa
• Fosfato monopotásico ^{(4, 5)}

¿Para qué se utiliza la prueba de ureasa?

• Se utiliza para detectar la presencia de H. pylori en el material de biopsia de tejido.
• Se utiliza para diferenciar entre Candida albicans y Cryptococcus neoformans. El primero es negativo para ureasa, mientras que el último es positivo para ureasa.
• Se realiza para identificar algunas especies de Enterobacterias como Klesiella y Proteus.
• La prueba de ureasa se realiza para identificar las especies de brucella y Cryptococcus. ^{(4, 5 y 6)}

Preparación y Procedimientos

• Los ingredientes secos se disuelven en agua destilada 100 m.
• Filtrar y esterilizar los ingredientes disueltos.
• El agar se suspende en 900 ml de agua destilada.
• Llevar a ebullición para asegurarse de que el agar esté completamente disuelto.
• Autoclave durante 15 minutos. La temperatura se establece en 121 grados Celsius.
• Deje que el agar se enfríe (de 50 a 55 grados Celsius).
• Añadir al menos 100 ml de base de urea al agar previamente preparado.
• Poner al menos 5 ml de la preparación en el tubo de ensayo e inclinar el tubo. Deje que se enfríe hasta que alcance el estado sólido. ^{(5, 6, 7 y 8)}

Una vez que se solidifique, puede continuar con el siguiente procedimiento:

• La superficie del agar inclinado que contiene urea se raya con una colonia aislada con al menos dos gotas del cultivo de caldo de infusión cerebro-corazón.
• Deje la tapa, pero asegúrese de que esté suelta.
• Incubar el tubo de ensayo durante 48 horas. Puedes incubarlo hasta por siete días. La temperatura ideal es entre 35 y 37 grados centígrados.
• Después del período de incubación, verifique si hay cambios en el color. El rosa es un resultado de afirmación. ^{(6, 8, 9 y 10)}

Resultado

El color de la inclinación cambia de naranja claro a rosa si el organismo que se está analizando es positivo para ureasa. Por otro lado, el color de la inclinación sigue siendo el mismo (naranja claro) si el organismo que se está analizando no produjo la enzima ureasa. ^{(2, 4)}

Los organismos que tienen la capacidad de producir ureasa incluyen:

• Criptococos
• Proteus
• Helicobacter pylori
• Corinebacteria
• Brucella ^{(5, 6)}

Imagen 3:Se puede hacer una prueba rápida de ureasa usando un kit de prueba.
Fuente de Imagen: researchgate.net

Prueba Rápida de Ureasa

Es uno de los procedimientos comúnmente utilizados para verificar la presencia de Helicobacter pylori. Se usa ampliamente porque el proceso es sencillo y económico.

La prueba rápida de ureasa verifica la presencia de ureasa en la mucosa gástrica. Antes de realizar una prueba rápida de ureasa, primero se debe realizar un procedimiento como una endoscopia gástrica y una biopsia de las células del revestimiento del estómago. ^{(6, 7)}

Limitacion

• Los microorganismos como H. pylori y Brucella dividen rápidamente la urea, lo que puede alterar el resultado de la prueba.
• Para una identificación completa, se debe realizar una prueba bioquímica y / o serológica.
• Evite el uso de inóculo de una suspensión de caldo para permitir el crecimiento y la hidrólisis de la urea.
• Se observa una reacción alcalina falsamente positiva si el cultivo se incuba durante un largo período de tiempo.
• No ponga el agar de urea inclinado en calor directo, ya que la urea es sensible al calor. La exposición al calor provoca la descomposición de la urea.
• Si está probando especies de Proteus, asegúrese de revisar la inoculación para detectar cualquier reacción dentro de las seis horas.
• Asegúrate de incubar el medio con una tapa suelta. No hacerlo puede alterar el resultado.
• Almacene el tubo de ensayo en un lugar oscuro, ya que la urea experimenta autohidrólisis cuando se expone a la luz.
• El agar de urea no solo debe ser la base para identificar la velocidad cuantitativa de la actividad ureasa porque diversos organismos tienen diferentes capacidades y velocidad de hidrólisis. ^{(1, 6, 9 y 10)}

Referencia

1. https://microbeonline.com/urease-test-principle-procedure-interpretation-and-urease-positive-organsims/
2. http://www.asmscience.org/content/education/protocol/protocol.3223
3. http://arh.adam.com/content.aspx?productId=49& pid=49 y gid=150484
4. https://microbiologyinfo.com/urease-test-principle-media-procedure-and-result/
5. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5960132/
6. https://en.wikipedia.org/wiki/Rapid_urease_test
7. https://www.sciencedirect.com/topics/pharmacology-toxicology-and-pharmaceutical-science/rapid-urease-test
8. http://www.biologypractical.com/urease-test-objective-principle-procedure-and-result/
9. https://microbenotes.com/urease-test-principle-procedure-and-result/
10. https://www.biosciencetimes.com/study-notes/microbiology-study-notes/urease-test-principle-procedure-and-result/197/