La prueba de Kastle-Meyer es un método forense económico, fácil y confiable para detectar la presencia de sangre. Aquí se explica cómo realizar la prueba.
Materiales
- Solución Kastle-Meyer
- etanol al 70 por ciento
- agua destilada o desionizada
- peróxido de hidrógeno al 3 por ciento
- bastoncillos de algodón
- gotero o pipeta
- una muestra de sangre seca
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Realice los Pasos del Análisis de Sangre de Kastle-Meyer
- Humedezca un hisopo con agua y tóquelo con una muestra de sangre seca. No es necesario frotar con fuerza ni cubrir el hisopo con la muestra. Solo necesitas una pequeña cantidad.
- Agrega una o dos gotas de etanol al 70 por ciento al hisopo. No es necesario que empape el hisopo. El alcohol no participa en la reacción, pero sirve para exponer la hemoglobina en la sangre para que pueda reaccionar más completamente para aumentar la sensibilidad de la prueba.
- Agrega una o dos gotas de la solución de Kastle-Meyer. Esta es una solución de fenolftaleína, que debe ser incolora o de color amarillo pálido. Si la solución es rosada o si se vuelve rosada cuando se agrega al hisopo, entonces la solución es vieja u oxidada y la prueba no funcionará. El hisopo debe estar incoloro o pálido en este punto. Si cambió de color, comience de nuevo con un poco de solución fresca de Kastle-Meyer.
- Agrega una o dos gotas de solución de peróxido de hidrógeno. Si el hisopo se vuelve rosado inmediatamente, esta es una prueba positiva de sangre. Si el color no cambia, la muestra no contiene una cantidad detectable de sangre. Tenga en cuenta que el hisopo cambiará de color y se volverá rosado después de aproximadamente 30 segundos, incluso si no hay sangre presente. Esto es el resultado de que el peróxido de hidrógeno oxida la fenolftaleína en la solución indicadora.
Método Alternativo
En lugar de humedecer el hisopo con agua, la prueba se puede realizar humedeciendo el hisopo con la solución de alcohol. El resto del procedimiento sigue siendo el mismo. Esta es una prueba no destructiva, que deja la muestra en una condición tal que puede analizarse utilizando otros métodos. En la práctica real, es más común recolectar una muestra nueva para pruebas adicionales.
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Sensibilidad y Limitaciones de la Prueba
El análisis de sangre de Kastle-Meyer es una prueba extremadamente sensible, capaz de detectar diluciones sanguíneas tan bajas como 1: 107. Si el resultado de la prueba es negativo, es una prueba razonable de que el hemo (un ingrediente en toda la sangre) está ausente en la muestra. Sin embargo, la prueba dará un resultado falso positivo en presencia de un agente oxidante en la muestra. Los ejemplos incluyen peroxidasas que se encuentran naturalmente en la coliflor o el brócoli. Además, es importante tener en cuenta que la prueba no diferencia entre moléculas de hemo de diferentes especies. Se requiere una prueba separada para determinar si la sangre es de origen humano o animal.
Cómo funciona la Prueba
La solución de Kastle-Meyer es una solución indicadora de fenolftaleína que se ha reducido, normalmente haciéndola reaccionar con zinc en polvo. La base de la prueba es que la actividad de tipo peroxidasa de la hemoglobina en la sangre cataliza la oxidación de la fenolftaleína reducida incolora en fenolftaleína rosa brillante.
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