Pasos Simples para Hacer Tampón de Citrato de Sodio

El tampón de citrato de sodio se usa con frecuencia para el aislamiento de ARN, porque minimiza la hidrólisis de bases de las cadenas de ARN, lo que lo hace invaluable para la purificación de ARNm durante la investigación genómica y para estudiar la transcripción. Los tampones basados en citrato también ayudan a la detección de antígenos en preparaciones de tejido fijo, porque rompen las reticulaciones formadas entre los antígenos y los medios de fijación.

Con los siguientes sencillos pasos, se puede crear un tampón de citrato de sodio con un pH de 6 (ácido) en menos de 10 minutos.

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Materiales para el Tampón de Citrato de Sodio

Se requieren pocos materiales para preparar el tampón de citrato de sodio. Con ácido cítrico, solo se necesita 1 M de hidróxido de sodio, agua destilada y una sonda de pH calibrada. El citrato de sodio es opcional.

La preparación del tampón también requiere un cilindro graduado de 1 litro, un matraz volumétrico de 1 litro y tres botellas de medios de 1 litro. Por último, necesitarás una barra agitadora magnética y un agitador magnético. Todos estos materiales se pueden encontrar en la escuela, laboratorios en el lugar de trabajo o se pueden comprar en línea o en tiendas de productos especializados.

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Dos Opciones para Hacer el Búfer

Existen dos métodos para fabricar tampones de citrato de sodio, según los materiales a los que tenga acceso.

1. Si tiene ácido cítrico y la base conjugada, cree una solución madre de cada uno mezclando 21 gramos de ácido cítrico en 1 litro de agua destilada y 29,4 gramos de citrato de sodio en 1 litro de agua destilada.
2. Si solo tiene ácido cítrico a mano, mezcle 2.1 gramos en poco menos de 1 litro de agua destilada.

Mezcla de Soluciones de Ácido Cítrico y Citrato de Sodio

Mezclar 82 mililitros de la solución de ácido cítrico con 18 mililitros de la solución de citrato de sodio. A esto, agregue suficiente agua destilada para llevar el volumen de la mezcla a un poco menos de 1 litro.

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Ajuste del pH

Mientras se agita suavemente la solución con un agitador magnético, se usa hidróxido de sodio 1 M para ajustar el pH de la mezcla a 6,0. Luego, con un matraz aforado, agregue más agua destilada para llevar el volumen total final de la solución a exactamente 1 litro.