Existen tres tipos de bombas que se utilizan en HPLC, como la jeringa, la bomba alterna y la neumática.
La cromatografía líquida de alto rendimiento es una técnica de importante separación en química analítica. El objetivo final del análisis HPLC es separar, identificar y cuantificar a los analitos en una mezcla de soluciones de muestra. Un instrumento de cromatografía líquida incluye un depósito de disolvente, bomba, columna, inyector y detector.
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Factores que afectan a la resolución en cromatografía HPLCComo su nombre indica necesita generar presión. A diferencia de otras técnicas de cromatografía, la cromatografía líquida de alto rendimiento es necesaria para generar presión mediante bombas. Sin una bomba adecuada, no es posible realizar análisis HPLC. La bomba de HPLC genera presión sobre la fase móvil para pasar por la columna. Dado que el tamaño de partículas de la columna HPLC es muy pequeño, la superficie es elevada y la separación incluso es eficiente. Sin embargo, la presión muy alta es necesaria para fluir la fase móvil, por tanto el HPLC requiere bombas capaces de generar alta presión. Por lo general, 500 a 4500 psi son la presión aceptable en el sistema HPLC.
La bomba HPLC tiene los siguientes requisitos estrictos:
- Genere suficiente presión a través de la columna HPLC.
- Tiene un flujo continuo y reproducible sin fluctuaciones en el sistema HPLC.
- Aptitud para una amplia gama de disolventes HPLC utilizados.
- La bomba debe ser capaz de coger disolvente de uno o más depósitos con salida sin polvo a distintos caudales.
Genera una presión uniforme sin fluctuaciones.
Puede ser sencillo de aplicar y operable a largo plazo. En función de estas necesidades de bombas, existen tres tipos de bombas HPLC disponibles.
1. Bombas de jeringa
2. Bombas alternativas
3. Bombas neumáticas
Bomba HPLC tipo jeringa:
Es un método sencillo utilizado en los primeros años. Esta bomba funciona generando una entrega sin pulso. Este tipo de bomba consiste en una jeringa grande que está motorizada por un motor electrónico que se utiliza para conducir un caudal constante. Esto es adecuado para la elución isocrática pero inconveniente para la elución del gradiente, puesto que no puede cambiar la composición de la fase móvil y su capacidad.
Bomba alterna (bomba de pistón):
Es una bomba muy utilizada puesto que su caudal preciso produce alta presión. Tiene un pequeño pistón accionado por motor que empujar la fase móvil debido a la acción hacia delante y hacia atrás del pistón presente. La bomba alternativa puede funcionar como modo isocrático y de gradiente.
Bomba neumática:
Como su nombre indica, el gas se utiliza para suprimir la fase móvil presente en un recipiente de disolvente plegable. Este tipo de bomba proporciona un flujo sin pulso y tiene un funcionamiento sencillo. Pero a causa de inconvenientes como la baja capacidad de los disolventes, la velocidad de la bomba varía con la viscosidad y la generación de baja presión.
