PDA es esencialmente un detector UV/Vis con una variedad de fotodiodos, ambos detectores son sencillos de utilizar e interpretar. La diferencia principal entre el detector UV y PDA es que la PDA es superior a la UV, ya que puede escanear todo el rango de 190-800 nm, mientras que UV/Vis sólo puede escanear una sola longitud de onda.
Los diferentes tipos de detectores tales como UV/VIS, masa, fluorescencia, índice de refracción, electroquímicos, conductividad, dispersión de la luz y detector IR se utilizan en el análisis HPLC, se clasifican en dos, es decir, detectores de solutos y de propiedades a granel. Sin embargo, cada forma de detector funciona con un principio de funcionamiento distinto.
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Tabla de contenidos
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¿Qué es un detector UV en HPLC?
Un detector UV es un dispositivo online que detecta la absorbancia UV del eluyente HPLC y genera una señal continua que se puede utilizar para calcular la cantidad de sustancias cromofóricas que se separan de la columna HPLC. El compuesto puede reconocerse midiendo la absorbancia de una solución de muestra de luz a diferentes longitudes de onda. La absorción UV varía según la longitud de onda que se utilice. Los detectores UV se clasifican en detectores de longitud de onda fija, longitud de onda variable o matriz de fotodiodos.
¿Qué es un detector de matriz de fotodiodos (PDA) en HPLC?
La matriz de fotodiodos (PDA), también conocida como detector de matriz de diodos (DAD), es capaz de medir todo el rango de longitud de onda en tiempo real, lo que puede tener ventajas adicionales. Es un detector de UV común que utiliza un sensor de imagen de fotodiodo para controlar el espectro completo UV/VIS del material (fase de analito/móvil) que se mueve a través de la celda de flujo.
Tanto los datos de absorbancia como los espectrales son producidos por el detector, que pueden utilizarse para la cuantificación, identificación y análisis de pureza máxima. Algunos fabricantes ofrecen un DAD como detector de longitudes de onda múltiple sin la función de escaneo espectral a un precio bajo.
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Visión general del detector UV y PDA:
Los detectores UV, VIS y PDA se clasifican como detectores de absorbancia; tienen una mejor sensibilidad a los niveles de picogramas (~PG) y los utilizan para detectar compuestos que tienen cromóforos (compuestos absorbentes de luz). UV es un detector ampliamente utilizado para la espectroscopia ultravioleta, así como para la cromatografía líquida de alto rendimiento.
La absorbancia UV varía según la fase móvil y el uso de la longitud de onda. Es importante seleccionar una longitud de onda adecuada en función del tipo de analito o componente. Un detector UV típico permite una selección de longitudes de onda de entre 190 nm y 400 nm. A diferencia de un detector UV, un detector Visible (VIS) utiliza longitudes de onda más largas, como 400 nm a 800 nm. El detector que ofrece una amplia selección de longitudes de onda, cubre un rango de UV-VIS (190-800 nm) llamado detector UV/VIS.
Por el contrario, el detector PDA pasa una amplia gama de luz a través de la muestra y después de esto, la luz se aísla en longitudes de onda individuales después de pasar por la muestra. El espectro de luz se dirige a una serie de diodos fotosensibles. Cada diodo puede cuantificar una longitud de onda diversa que considera el seguimiento de numerosas longitudes de onda a la vez. Por lo general, sólo se utilizan 1-2 longitudes de onda durante el recorrido cromatográfico.
Diferencia entre el detector UV y PDA en HPLC:
- La diferencia clave entre el detector UV y PDA en HPLC es que el detector de matriz de fotodiodos puede medir el área del pico y la altura del pico específico de la muestra o analizado en las distintas longitudes de onda en el rango de 200 a 800 nm, mientras que un detector UV puede determinar el área y la altura del pico en sólo una o dos longitudes de onda separadas, pero también debe seleccionarse la longitud de onda antes de inyectar la solución de muestra al inyector HPLC.
- El detector UV/Vis sólo puede detectar una sola longitud de onda a la vez, mientras que el DAD puede escanear una longitud de onda distinta (190-800 nm).
- En un sistema HPLC tradicional con un detector UV/VIS, la longitud de onda del compuesto debe añadirse manualmente, pero en un sistema HPLC con un detector PDA, no es necesario añadir manualmente la longitud de onda porque detecta automáticamente todo el rango.
- La cromatografía líquida de alto rendimiento es capaz de separar los picos de degradación de la substancia del fármaco. Debido a las amplias aplicaciones y ventajas en el análisis farmacéutico, un detector de matriz de fotodiodos es más preferido que un detector de ultravioleta para llevar a cabo el deterioro forzado, las pruebas de estrés y los métodos analíticos que indican el estabilidad.
- PDA es una mejor opción si desea escanear un rango de longitud de onda, mientras que si conoce la longitud de onda de absorción, puede utilizar un detector UV/VIS para detectar esta longitud de onda en particular.
- El detector UV/Vis requiere mucho tiempo; mientras que PDA proporciona un análisis rápido, por tanto, es una opción preferible para el desarrollo de métodos de analito de muestra.
