¿Cuál es la diferencia entre el micronúcleo y el ensayo cometa?

Que diferencia principal entre ensayo de micronúcleo y cometa es que el ensayo de micronúcleos es importante para detectar daños cromosómicos como resultado de la exposición a mutágenos, mientras que el ensayo cometa es importante para detectar daños primarios en el ADN de células individuales.

Los ensayos de genotoxicidad ayudan a evaluar la posibilidad de mutaciones y anomalías cromosómicas. Las genotoxinas incluyen sustancias químicas y radiación. Carcinógenos, mutágenos y teratógenos son las principales categorías de genotoxinas. Causan diversos daños, como mutaciones puntuales, deleciones, roturas de cadena simple y doble, aberraciones cromosómicas, micronucleación, reparación del ADN e interacciones del ciclo celular. Tales condiciones pueden conducir a una variedad de enfermedades, y las pruebas de genotoxicidad previenen el daño potencial de estas condiciones. El ensayo de micronúcleo y el ensayo de cometa son dos técnicas entre los ensayos de genotoxicidad.

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CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia clave
2. ¿Qué es un ensayo de micronúcleos?
3. ¿Qué es un ensayo cometa?
4. Similitudes: ensayo de micronúcleos y cometas
5. Ensayo de micronúcleo frente a cometa en forma tabular
6. Resumen: ensayo de micronúcleo frente a cometa

¿Qué es un ensayo de micronúcleos?

El ensayo de micronúcleos es un ensayo para evaluar el daño cromosómico como resultado de la exposición a mutágenos. Es importante en la detección de productos químicos que causan la formación de husos y micronúcleos. Un ensayo de micronúcleos proporciona información sobre la estabilidad de los productos químicos cuando interfieren con la estructura y función de los cromosomas. Muchos carcinógenos dan positivo en ensayos de micronúcleos. El procedimiento de ensayo implica el tratamiento químico y la medición de la frecuencia de células micronucleadas. Si el número de micronúcleos aumenta de manera anormal, se concluye que el químico está causando daño cromosómico.

Un ensayo de micronúcleo generalmente se realiza en células que se dividen activamente. Por lo tanto, los eritrocitos y las células madre de la médula ósea producidas por división celular son candidatos ideales para tales ensayos. Experimenta una rotación constante y rápida. Debido a que los eritrocitos no tienen verdaderos núcleos celulares, las células micronucleadas se vuelven más visibles al final del ensayo.

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Figura 01: Observación del ensayo de micronúcleos

Los ensayos de micronúcleos son económicos, más rápidos, convenientes y requieren menos experiencia para realizarlos. Reflejan las aberraciones cromosómicas de manera rápida y confiable y son extremadamente útiles para evaluar rápidamente el daño cromosómico. Un tipo específico y versátil de ensayo de micronúcleos es el ensayo de citocinesis de micronúcleos en bloque (CBMNcyt). Es el ensayo preferido para medir el daño cromosómico y la inestabilidad en las células. Sin embargo, el principal problema con el uso del ensayo de micronúcleos es que no puede determinar diferentes tipos de aberraciones cromosómicas y el ensayo tiene un impacto en la tasa mitótica y el porcentaje de muerte celular, cambiando así los resultados.

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¿Qué es un ensayo cometa?

El ensayo cometa, también conocido como ensayo de electroforesis en gel único, es una técnica sencilla y sensible para detectar daños en el ADN. Mide roturas de ADN en células eucariotas y es una técnica estándar para el control biológico y las pruebas de genotoxicidad.

El ensayo Comet está implicado en la encapsulación de células en suspensiones de agarosa de bajo punto de fusión, la lisis de células en condiciones neutras o alcalinas y la electroforesis de células lisadas suspendidas. Durante el proceso de encapsulación, las células se suspenden en agarosa fundida de bajo punto de fusión, y la agarosa forma una matriz de fibras de carbohidratos para anclarlas en su lugar. La agarosa es osmóticamente neutra; por lo tanto, permite que las soluciones penetren a través del gel y afecten las células sin perturbarlas ni desplazarlas. La solución de lisis es una solución salina acuosa altamente concentrada y detergente. Esta sal destruye las proteínas y los patrones de unión dentro de la célula mientras destruye el contenido de ARN de la célula. Las células se rompen y todas las proteínas, ARN, componentes citoplásmicos y nucleoplásmicos se destruyen y se difunden en la matriz de agarosa dejando atrás el ADN.

Figura 02: Ensayo de cometa

La solución de electroforesis es una solución alcalina en la que se desnaturaliza la doble hélice del ADN y el nucleoide se vuelve monocatenario. Durante este proceso, se aplica un campo eléctrico para analizar las imágenes. El análisis de imágenes mide la intensidad de fluorescencia total del ADN y el nucleoide y los compara. La estructura general se asemeja a un cometa con una cabeza circular que corresponde al ADN restante no dañado y una cola para el ADN dañado. Cuanto más brillante y más larga sea la cola debido a señales más fuertes, mayor será el daño.

¿Cuáles son las similitudes entre el ensayo de micronúcleo y cometa?

• Micronucleus y Comet Assay son económicos, más rápidos, más convenientes y requieren menos habilidad.
• Se realizan principalmente en el ADN.
• Ambos ensayos ayudan a evaluar mutaciones y anomalías cromosómicas.
• Además, ambas técnicas utilizan productos químicos para realizar el procedimiento.

¿Cuál es la diferencia entre el micronúcleo y el ensayo cometa?

El ensayo de micronúcleos es importante para detectar daños cromosómicos como resultado de la exposición a mutágenos, mientras que el ensayo de cometa es importante para detectar daños primarios en el ADN de células individuales. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre el micronúcleo y el ensayo del cometa. Además, el ensayo de micronúcleos está bien establecido para detectar clastogenicidad y aneugenicidad. El ensayo Comet sirve como prueba de genotoxicidad para detectar daños primarios en el ADN de las células. Además, un ensayo de micronúcleo proporciona información sobre la estabilidad de los productos químicos, mientras que un ensayo de cometa es una electroforesis en gel de una sola célula.

La siguiente infografía muestra las diferencias entre el micronúcleo y el ensayo cometa en forma tabular para una comparación directa..

Resumen: Ensayo de micronúcleo frente a cometa

Los ensayos de genotoxicidad ayudan a evaluar la posibilidad de mutaciones y anomalías cromosómicas. El ensayo de micronúcleo y el ensayo de cometa son dos técnicas entre los ensayos de genotoxicidad. El ensayo de micronúcleos evalúa el daño cromosómico resultante de la exposición a un mutágeno. El ensayo del cometa es una técnica sencilla y sensible para detectar daños en el ADN. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre el micronúcleo y el ensayo del cometa. El ensayo de micronúcleos es importante en la detección de sustancias químicas que provocan la formación de husos y micronúcleos. El ensayo Comet está implicado en la encapsulación de células en suspensiones de agarosa de bajo punto de fusión, la lisis de células en condiciones neutras o alcalinas y la electroforesis de células lisadas suspendidas.

Relación:

1. "Prueba del cometa". Sigmadrich.
2. "Prueba de micronúcleos". Una visión general | Temas de ScienceDirect.

Imagen de cortesía:

1. "Fabricación de máscaras para la detección automática de micronúcleos" por Genomicintegrity - Trabajo propio (CC BY 4.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Casplabapp" de Koncak - Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia