¿Cuál es la diferencia entre la tinción de Coomassie y la de plata?

Que diferencia principal entre Coomassie y tinción de plata es que la tinción de Coomassie es una técnica de tinción de proteínas que utiliza la tinción azul brillante de Coomassie, mientras que la tinción de plata es una técnica de tinción de proteínas que utiliza la tinción de plata.

La separación e identificación de proteínas son pasos críticos en el análisis del proteoma. Necesita una caracterización de proteínas de alta resolución después de la electroforesis en gel. Existen numerosas técnicas de tinción que incluyen diversos colorantes como colorantes aniónicos (Azul Brillante de Coomassie), cationes metálicos (imidazol zinc), colorantes de plata y colorantes fluorescentes, etc. A veces también se pueden utilizar sondas radiactivas. La elección de la técnica de tinción depende de su simplicidad, la disponibilidad de equipos de imagen en el laboratorio, etc.

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CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia clave
2. ¿Qué es la tinción de Coomassie?
3. ¿Qué es la tinción de plata?
4. Similitudes: tinción de Coomassie y plata
5. Coomassie frente a tinción de plata en forma tabular
6. Resumen: tinción de Coomassie frente a tinción de plata

¿Qué es la tinción de Coomassie?

La tinción de Coomassie es una técnica de tinción de proteínas que utiliza la tinción azul brillante de Coomassie. dice general la técnica del azul de Coomassie. Coomassie Brilliant Blue es el tinte proteico aniónico más popular. Este colorante suele teñir casi todas las proteínas con una buena linealidad cuantitativa a una sensibilidad moderada. La tinción azul brillante de Coomassie se une de forma no específica a casi todas las proteínas. Hay dos variantes diferentes de coloración Coomassie Brilliant Blue: R-250 y G-250. R-250 ofrece tiempos de teñido más cortos, mientras que G-250 está disponible en formulaciones más sensibles y respetuosas con el medio ambiente.

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Figura 01: tinción de Coomassie

Los tintes de Coomassie son muy populares en la espectrometría de masas y en los estudios de identificación de proteínas. Además, la tinción Biosafe Coomassie es una formulación no peligrosa de Coomassie Blue G-250 actualmente en el mercado. La ventaja de esta formulación es que solo se necesita agua para enjuagar y decolorar. La tinción de Coomassie de bioseguridad proporciona una sensibilidad equivalente a la del azul de Coomassie G-250 tradicional, pero mejor que la tinción de Coomassie R-250. Además, presenta un protocolo de tinción más simple y rápido que el tradicional Coomassie Blue G-250. La desventaja de la tinción con azul de Coomassie es que es menos sensible en comparación con la tinción con plata. La tinción con azul de Coomassie es unas 50 veces menos sensible que la tinción con plata. Sin embargo, debido a su facilidad de unión, se prefiere en muchos estudios.

¿Qué es la tinción de plata?

La tinción con plata es una técnica de tinción de proteínas que utiliza la tinción con plata. La tinción con plata se utiliza para teñir tanto los geles de agarosa como los de poliacrilamida. La tinción con plata de proteínas en geles de agarosa fue desarrollada por primera vez por Kerenyi y Gallyas en 1973. Posteriormente se adaptó para proteínas en geles de poliacrilamida utilizados en SDS-PAGE. Actualmente, la tinción con plata también se usa para teñir ADN o ARN. En este método, para teñir los geles, los geles se incuban con solución de nitrato de plata. La tinción de plata tiñe las áreas donde las proteínas están presentes de marrón a negro.

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Figura 02: Tinción de plata

La intensidad de la tinción de plata depende de la estructura primaria de la proteína. La limpieza de los recipientes utilizados y la pureza de los reactivos también pueden afectar la calidad de la tinción de plata. Sin embargo, la desventaja de la tinción con plata es que no se pueden detectar todas las proteínas, especialmente las glicoproteínas y las proteínas con grandes grupos modificados en sus cadenas laterales.

¿Cuáles son las similitudes entre la tinción de Coomassie y la plata?

• Coomassie y la tinción de plata son dos técnicas utilizadas en la tinción de proteínas.
• Pueden teñir proteínas y ADN.
• Ambas técnicas de tinción tienen desventajas.
• Estas técnicas tienen pasos similares, como fijación, tinción y blanqueamiento.

¿Cuál es la diferencia entre la tinción de Coomassie y la de plata?

La tinción de Coomassie es una técnica de tinción de proteínas que utiliza la tinción azul brillante de Coomassie, mientras que la tinción de plata es una técnica de tinción de proteínas que utiliza la tinción de plata. Entonces, esta es la diferencia clave entre Coomassie y la tinción de plata. Además, la tinción de Coomassie es menos sensible que la tinción de plata.

La siguiente infografía enumera las diferencias entre la tinción de Coomassie y la plata en forma tabular para una comparación directa.

Resumen - Coomassie vs. Tinción de plata

Para visualizar proteínas, se puede realizar una reacción química de unión de tinte o de producción de color específica de proteína. Esto se llama tinción de proteínas. Coomassie y la tinción de plata son dos técnicas utilizadas en la tinción de proteínas. La técnica de tinción de Coomassie usa tinción azul brillante de Coomassie, mientras que la tinción de plata usa tinción de plata. Entonces, esta es la diferencia clave entre Coomassie y la tinción de plata.

Relación:

1ra R, Brunelle JL, Verde. “Tinción con azul de Coomassie.” Métodos en Enzimología, Biblioteca Nacional de Medicina de EE.UU.
2. Chevallet, Mireille, et al. "Tinción de plata de proteínas en geles de poliacrilamida". Registros de la naturaleza, pub de la naturaleza. grupo, 2006.

Imagen de cortesía:

1. "SDS-PAGE Coomasie Stained" por piemmea - Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
2. "PÁGINA AgStain Microsat" por ParinoidMarvin - Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia