¿Cuál es la diferencia entre Yeast One Hybrid y Yeast Two Hybrid?

Que diferencia principal entre levadura un híbrido y levadura dos híbridos es que la levadura es un hibrido in vitro ensayo basado para analizar las interacciones ADN-proteína, mientras que los dos híbridos de levadura son un in vitro Ensayo basado en el análisis de interacciones proteína-proteína.

El estudio de las interacciones entre las moléculas celulares puede ayudar a definir los sitios de reconocimiento implicados en la expresión génica y las vías de las proteínas. Las interacciones de ADN y proteínas son parte integral de los procesos celulares como las modificaciones del ADN y la regulación de la transcripción, etc. Por otro lado, las interacciones de proteínas y proteínas desempeñan un papel crucial en los procesos celulares como la replicación, la transcripción, la traducción y la señalización. Por lo tanto, es de crucial importancia identificar estas interacciones de moléculas celulares a través de diferentes ensayos. Yeast One Hybrid y Yeast Two Hybrid son dos in vitro ensayos basados ​​en el análisis de las interacciones ADN-proteína y proteína-proteína.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia clave
2. ¿Qué es Yeast One Hybrid?
3. ¿Qué es Yeast Two Hybrid?
4. Similitudes - Levadura Uno Híbrido y Levadura Dos Híbridos
5. Yeast One Hybrid vs. Yeast Two Hybrid en forma tabular
6. Resumen - Híbrido de levadura uno versus híbrido de levadura dos

¿Qué es Yeast One Hybrid?

Yeast One Hybrid (Y1H) es un in vitro ensayo basado para analizar las interacciones intracelulares de ADN-proteína. Este método fue introducido por primera vez por Wang y Reed en 1993. Desde entonces, ha mostrado un mayor poder en la investigación biológica. Hay dos componentes principales en este ensayo: señuelo de ADN y presa proteica.

Figura 01: Levadura Uno Híbrido

Primero, se clona una secuencia de ADN (cebo de ADN) frente a dos reporteros diferentes (HIS3, LacZ). Estas construcciones indicadoras se integran en el genoma de una cepa de levadura. Los factores de transcripción se toman como presa proteica. Los factores de transcripción se fusionan con el dominio de activación transcripcional (AD) del factor de transcripción Gal4 de levadura para producir proteínas híbridas. Toda esta proteína híbrida se integra en un plásmido antes de introducirse en la cepa de levadura. Después de la introducción del plásmido recombinante, cuando el factor de transcripción interactúa con el fragmento de ADN, la fracción AD activa la expresión del gen informador (HIS3 o LacZ). La secuenciación de los plásmidos permite identificar el factor de transcripción que puede unirse al fragmento de ADN. Recientemente, el método de un híbrido de levadura se ha utilizado para investigar el diagnóstico de enfermedades. Por lo tanto, esta prueba se utilizará más ampliamente en investigaciones científicas y tratamientos médicos en el futuro.

¿Qué es Yeast Two Hybrid?

La levadura de dos híbridos (Y2H) es una in vitro Ensayo basado para analizar proteínas intracelulares e interacciones de proteínas. Este método fue desarrollado originalmente por Stanley Fields y Ok-Kyu Song en 1989. Esta técnica detecta interacciones proteína-proteína utilizando el factor de transcripción Gal4 de levadura.

Figura 02: Dos Híbridos de Levadura

En este método, primero se construyen dos fusiones (híbridos) utilizando proteínas de interés: fusionando una proteína con un dominio de unión al ADN (DBD) y fusionando la otra proteína con el dominio activador (AD) del factor de transcripción Gal4. La proteína fusionada con DBD se conoce como cebo, mientras que la proteína fusionada con AD se conoce como presa. En la cepa de levadura, tras la interacción del cebo y la presa, DBD y AD se acercan mucho para generar un factor de transcripción Gal4 funcional cadena arriba del gen informador. El factor de transcripción funcional activa la expresión del gen informador. Además, este método se utiliza actualmente para estudiar las interacciones de proteínas integrales de membrana en células de mamíferos.

¿Cuáles son las similitudes entre Yeast One Hybrid y Yeast Two Hybrid?

• Yeast One Hybrid y Yeast Two Hybrid son dos in vitro ensayos basados ​​en el análisis de las interacciones ADN-proteína y proteína-proteína.
• Estos ensayos utilizan cepas de levadura.
• Ambos ensayos utilizan el dominio de activación (AD) del factor de transcripción Gal4.
• Utilizan la expresión del gen reportero (HIS3 o LacZ) para detectar interacciones.
• Tienes carnada y presa.
• Ambos ensayos son muy útiles en la investigación biológica moderna.

¿Cuál es la diferencia entre Yeast One Hybrid y Yeast Two Hybrid?

La levadura un híbrido es un in vitro ensayo basado para analizar el ADN y las interacciones proteicas, mientras que la levadura de dos híbridos es un in vitro Ensayo basado en el análisis de proteínas e interacciones de proteínas. Entonces, esta es la diferencia clave entre el híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos. Además, en el híbrido de levadura, el cebo es un fragmento de ADN y la presa es una molécula de proteína. Por otro lado, en los dos híbridos de levadura, tanto el cebo como la presa son moléculas de proteína.

La siguiente infografía enumera las diferencias entre el híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos en forma tabular para una comparación directa.

Resumen: levadura uno híbrido frente a levadura dos híbrido

Yeast One Hybrid y Yeast Two Hybrid son dos importantes in vitro ensayos basados La levadura un híbrido es un in vitro ensayo basado para analizar el ADN y las interacciones proteicas, mientras que la levadura de dos híbridos es un in vitro Ensayo basado en el análisis de proteínas e interacciones de proteínas. Entonces, esta es la diferencia clave entre el híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos.

Relación:

1. Reece-Hoyes, John S. y Albertha JM Walhout. "Ensayos de un híbrido de levadura centrados en el gen". Methods of Molecular Biology (Clifton, NJ), Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU., 2012.
2. Shaffer, Dra. catalina "Aplicaciones de detección de dos híbridos de levadura". Noticias, 26 de febrero de 2019.

Imagen de cortesía:

1. "Figura 17 05 01" por CNX OpenStax - (CC BY 4.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Ensayo de dos híbridos" por Anna - Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia