Diferencia entre BL21 y DH5 Alpha

Que diferencia principal entre BL21 y DH5 Alfa es que BL21 es un proteasa deficiente genéticamente competente E. coli Célula utilizada principalmente para la expresión de proteínas, mientras que DH5 Alpha es un competente diseñado genéticamente E. coli Célula con mutación recA1 utilizada principalmente para la transformación de plásmidos.

E. coli es uno de los famosos organismos de elección para la producción de proteínas recombinantes. Se ha convertido en la plataforma de expresión más popular a lo largo de los años. También se utiliza como fábrica de células. BL21 y DH5 Alpha son dos modificados genéticamente E. coli Células utilizadas actualmente para la expresión de proteínas y la transformación de plásmidos, respectivamente.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia clave
2. ¿Qué es BL21?
3. ¿Qué es DH5 Alfa?
4. Similitudes: BL21 y DH5 Alpha
5. BL21 vs. DH5 Alpha en forma tabular
6. Resumen: BL21 frente a DH5 Alpha

¿Qué es BL21?

BL21 es un competente diseñado genéticamente deficiente en proteasa E. coli Célula utilizada principalmente para la expresión de proteínas. E. coli BL21 es una célula bacteriana derivada de la cepa B. Tiene defectos en la proteasa Lon y la proteasa de membrana externa ompT. Es ampliamente utilizado para la expresión de proteínas recombinantes ya que suele conferir estabilidad a las proteínas expresadas. BL21 es útil para la expresión de proteínas con pCold I-IV DNA y pCold TF DNA. Pero este competente E. coli La célula no está destinada a un sistema de expresión de proteínas que utilice el promotor T7, como p. B. el sistema pET. Esto se debe a que BL21 no expresa la polimerasa de ARN T7. Además, no se recomienda su uso para construir o hacer plásmidos ya que no tiene mutación recA.

Figura 01: BL21

BL21 fue descrito por primera vez por Studier en 1986 después de varias modificaciones del linaje B. Las células BL21 carecen de la proteasa LON, que descompone muchas proteínas extrañas. También carece de otro gen que codifica la proteasa de membrana externa (OmpT), cuya función es descomponer las proteínas extracelulares. Una deficiencia en estas proteínas desencadena la producción exitosa de proteínas extrañas. E. coli células BL21. Además, la mutación hsdSB en estas células evita la metilación y destrucción de ADN extraño en las células BL21.

¿Qué es DH5 Alfa?

DH5 Alpha es un Competente modificado genéticamente E. coli Célula con mutación recA1 utilizada principalmente para la transformación de plásmidos. DH5Alfa E. coli Las células son modificadas genéticamente por el biólogo estadounidense Douglas Hanahan para maximizar la eficiencia de transformación. La célula alfa DH5 tiene tres mutaciones distintas: recA1, endA1 y lacZΔM15. recA1 es una mutación de punto único que reemplaza la glicina 160 con un residuo de ácido aspártico en el polipéptido recA. Esta mutación anula la actividad de las recombinasas e inactiva la recombinación homóloga. La mutación endA1 inactiva una endonucleasa intracelular que evita que degrade el plásmido insertado.

Figura 02: DH5 Alfa

Además, la mutación lacZΔM15 permite la detección azul-blanca de las células transformadas. Estas células son células competentes. A menudo se utilizan en la transformación de cloruro de calcio para insertar el plásmido deseado. A través de investigaciones recientes, se descubrió que la célula alfa DH5 que usaba el método de Hanahan era la célula competente más eficiente para la transformación de plásmidos.

¿Cuáles son las similitudes entre BL21 y DH5 Alpha?

• BL21 y DH5 Alpha son dos modificados genéticamente E. coli
• Ambas son células competentes.
• Consisten en diferentes mutaciones.
• Ambos no tienen hábitat natural.
• Estos se utilizan con fines de laboratorio, como estudios de expresión y procedimientos de clonación.

¿Cuál es la diferencia entre BL21 y DH5 Alpha?

BL21 es un competente diseñado genéticamente deficiente en proteasa E. coli Célula utilizada principalmente para la expresión de proteínas. Por otro lado, DH5 Alpha es algo diseñado genéticamente. E. coli Célula con mutación recA1 utilizada principalmente para la transformación de plásmidos. Esta es la principal diferencia entre BL21 y DH5 Alpha. También BL21 E. coli La célula no tiene mutación recA1 mientras que DH5 Alpha E. coli La célula tiene una mutación recA1.

La siguiente infografía tabula las diferencias entre el BL21 y el DH5 Alpha.

Resumen: BL21 frente a DH5 Alpha

Las cepas no patógenas de E. coli son modificados genéticamente por científicos para estudios de expresión en laboratorio y fines de clonación. BL21 y DH5 Alpha son dos modificados genéticamente E. coli células. BL21 se utiliza principalmente para estudios de expresión de proteínas. Por otro lado, DH5 Alpha se utiliza principalmente para fines de transformación de plásmidos. Así que este es el resumen de la diferencia entre BL21 y DH5 Alpha.

Relación:

1. "BL21-E. coli competente" New England Biolabs: reactivos para la industria de las ciencias de la vida.
2. "Células de E. coli químicamente competentes DH5-alfa". GoldBio.

Imagen de cortesía:

1. "Análisis de objetivos de SUMO codificados por citomegalovirus humano y regulación temporal de SUMOylation-of-pone.0103308.g001" por Kim E, Kim Y, Kim Y, Lee M, Hayward G , Ahn J – “Análisis de objetivos SUMO codificados por citomegalovirus humanos y regulación temporal de la SUMOilación de proteínas inmediatas tempranas IE1 e IE2 durante la infección” PLOS ONE. DOI:10.1371/journal.pone.0103308. PMID 25050850. PMC: 4106884 (CC BY 4.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Colonias alfa DH5 que crecen en una placa Amp" Por Balapagos (CC BY-SA 2.0) a través de Flickr