Diferencia entre sondas radiactivas y no radiactivas

Que diferencia principal entre sondas radiactivas y no radiactivas es que las sondas radiactivas son secuencias de ADN o ARN de cadena sencilla marcadas con isótopos radiactivos, mientras que las sondas no radiactivas son secuencias de ADN o ARN de cadena sencilla marcadas con una etiqueta química o fluorescente.

La hibridación de ácidos nucleicos es una técnica importante en biología molecular, especialmente en el diagnóstico microbiano. Ayuda a identificar o detectar una secuencia de ácido nucleico específica. En esta técnica, los ácidos nucleicos se fijan a una superficie sólida y se hibridan con una sonda. Una sonda es un fragmento de ADN o ARN que es complementario a una secuencia de interés. Si la secuencia diana está presente en la muestra, la sonda se hibrida con ella y la vuelve detectable. Hay dos tipos de sondas como sondas radiactivas y no radiactivas. Por lo tanto, podemos etiquetar las sondas con una etiqueta radiactiva o una etiqueta fluorescente.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia clave
2. ¿Qué son las sondas radiactivas?
3. ¿Qué son las sondas no radiactivas?
4. Similitudes entre sondas radiactivas y no radiactivas
5. Comparación lado a lado: sondas radiactivas frente a no radiactivas en forma tabular
6. Resumen

¿Qué son las sondas radiactivas?

Las sondas radiactivas son fragmentos de ADN o ARN de cadena sencilla con una etiqueta radiactiva. Los radioisótopos se utilizan para fabricar sondas radiactivas. radioisótopos ³²PAGS, ³³P y ³⁵S se utilizan comúnmente en el etiquetado de sondas. También radioisótopos ³mano ¹²⁵1 también se utilizan en menor medida para marcar palpadores. Pero se utilizan para aplicaciones específicas. Entre los diferentes radioisótopos, ³²P es el isótopo más comúnmente utilizado en el etiquetado de sondas radiactivas.

Las sondas radiactivas ofrecen un mayor nivel de fiabilidad y especificidad. Por lo tanto, ofrecen la máxima sensibilidad y permiten una cuantificación precisa de las secuencias diana. Sin embargo, existen varias desventajas asociadas con las sondas radiactivas. Tienen vidas medias cortas. Además, son peligrosos y su manipulación plantea problemas de fabricación, uso y eliminación. Además, fabricar una sonda radiactiva es un proceso costoso. Por lo tanto, las sondas radiactivas no se utilizan hoy en día como sondas no radiactivas debido a problemas de seguridad y coste.

¿Qué son las sondas no radiactivas?

Las sondas no radiactivas son el segundo tipo de sondas que están marcadas químicamente. La digoxigenina es una sonda no radiactiva que es un marcador basado en anticuerpos. Las sondas de digoxigenina son específicas y sensibles. La biotina es otra etiqueta utilizada en la fabricación de sondas no radiactivas. Los sistemas de detección biotina/estreptavidina y digoxigenina/anticuerpo son las sondas no radiactivas más utilizadas en hibridación. Además, el sistema de peroxidasa de rábano picante es otro sistema de sonda no radiactivo. Una vez hibridadas con las secuencias diana, estas sondas no radiactivas pueden detectarse mediante autorradiografía u otras técnicas de formación de imágenes.

Las sondas no radiactivas se usan más comúnmente en la hibridación de ácidos nucleicos que las sondas radiactivas. Esto se debe a que las sondas no radiactivas no están asociadas con materiales peligrosos. Además, los métodos de detección no radiactivos requieren tiempos de exposición más cortos para detectar la señal de hibridación. Sin embargo, los pasos involucrados en la hibridación de ADN con sondas no radiactivas suelen ser largos y requieren mucho tiempo. Además, las soluciones disponibles comercialmente son caras.

¿Cuáles son las similitudes entre las sondas radiactivas y no radiactivas?

• Las sondas radiactivas y no radiactivas son dos tipos de sondas utilizadas en la hibridación de ácidos nucleicos.
• Facilitan la detección de secuencias diana en la muestra.
• Ambos tipos de sonda son igualmente sensibles y específicos.

¿Cuál es la diferencia entre sondas radiactivas y no radiactivas?

Las sondas radiactivas son secuencias de ADN o ARN de cadena sencilla marcadas con isótopos radiactivos, mientras que las sondas no radiactivas son secuencias de ADN o ARN de cadena sencilla marcadas con un marcador químico. Entonces, esta es la diferencia clave entre las sondas radiactivas y no radiactivas. Los isótopos radiactivos también son peligrosos. Por lo tanto, las sondas radiactivas son considerablemente peligrosas, mientras que las no radiactivas no son peligrosas.

Además, otra diferencia entre las sondas radiactivas y no radiactivas son sus desventajas. Las vidas medias cortas y los peligros asociados con su fabricación, uso y eliminación son las desventajas del uso de sondas radiactivas. Por otro lado, los pasos involucrados en la hibridación de ADN con sondas no radiactivas suelen ser tediosos y lentos.

Resumen: sondas radiactivas frente a no radiactivas

Una sonda es un fragmento de ADN o ARN que contiene una secuencia de nucleótidos complementaria a la secuencia de interés. Para detectar la secuencia diana, las sondas se pueden marcar de forma radiactiva, fluorescente o química. Las sondas se unen a secuencias complementarias en la muestra. Las sondas radiactivas se marcan con isótopos radiactivos, mientras que las no radiactivas se marcan con biotina, digoxigenina o peroxidasa de rábano picante. Entonces, esta es la diferencia clave entre las sondas radiactivas y no radiactivas.

Relación:

1. "Sonda de hibridación". En.Wikipedia.Org, 2020, Disponible aquí.

Imagen de cortesía:

1. "Resultados de la hibridación in situ de las sondas BAC de los cromosomas X e Y" Por Joanne H. Hsu, Hui Zeng, Kalistyn H. Lemke, Aris A. Polyzos, Jingly F. Weier, Mei Wang, Anna R. Lawin-O' Brien, Heinz-Ulrich G. Weier y Benjamin O'Brien - Joanne H. Hsu et al. "Repeticiones de ADN específicas de cromosomas: identificación rápida in silico y validación por hibridación in situ con fluorescencia" Int. J mol Ciencias. 2013, 14(1), 57-71; doi:10.3390/ijms14010057 (CC BY 3.0) vía Commons Wikimedia

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