5 Tipos de microscopios con definiciones, principios, usos, diagramas etiquetados

5 tipos de microscopios

Hay principalmente 5 tipos comunes de microscopios de la siguiente manera:

1. Microscopio de luz o de campo óptico
2. Microscopio de campo oscuro
3. Microscopio de contraste de fase
4. microscopio de fluorescencia
5. microscopio electronico

Un buen microscopio debe tener tres propiedades:

1. Buena resolución: El poder de resolución se refiere a la capacidad de producir imágenes separadas de objetos cercanos para que puedan distinguirse como dos entidades separadas. El poder de resolución de:
   • El ojo humano solo mide aproximadamente 0,2 mm (200 μm)
   • El microscopio óptico mide aproximadamente 0,2 μm.
   • Un microscopio electrónico mide aproximadamente 0,5 nm.
     La resolución depende del índice de refracción. El aceite tiene un índice de refracción más alto que el aire.
2. Buen contraste: Esto se puede mejorar aún más tiñendo la muestra.
3. Buen aumento: Esto se logra mediante el uso de lentes cóncavas.

El microscopio óptico o de campo brillante forma una imagen oscura sobre un fondo más brillante.

Principio: En un microscopio de campo oscuro, el objeto aparece brillante contra un fondo oscuro. Esto es posible gracias al uso de un condensador especial de campo oscuro.

Aplicaciones: Se utiliza para identificar células vivas no teñidas y bacterias delgadas, como las espiroquetas, que no se pueden ver con un microscopio óptico.

Se utiliza para visualizar células vivas creando una diferencia de contraste entre las células y el agua. Convierte ligeras diferencias en el índice de refracción y la densidad celular en cambios fácilmente detectables en la intensidad de la luz.

Es útil para estudiar:

• motilidad microbiana
• Determinación de la forma de las células vivas.
• Detección de componentes bacterianos como endosporas y cuerpos de inclusión.

Principio: Cuando los tintes fluorescentes se exponen a los rayos ultravioleta (UV), se excitan y se dice que son fluorescentes, lo que significa que convierten estos rayos invisibles de longitud de onda corta en luz de longitud de onda más larga (luz visible).

Aplicaciones: El microscopio de epifluorescencia tiene las siguientes aplicaciones:

• Autofluorescencia, cuando se coloca bajo una lámpara UV, por ejemplo ciclospora
• Los microbios recubiertos con el tinte fluorescente, p. naranja de acridina para los parásitos de la malaria (QBC) y fenol auramina para Tuberculosis M..
• Inmunofluorescencia: utiliza un anticuerpo marcado con colorante fluorescente para detectar antígenos de la superficie celular o anticuerpos unidos a antígenos de la superficie celular. Hay tres tipos: IF directa, IF indirecta y citometría de flujo.

Fue inventado por Ernst Ruska en 1931. Se diferencia de un microscopio óptico en varios aspectos.

Hay dos tipos de EM:

• transmisión electromagnética (Tipo MC, examina la estructura interna, resolución 0.5nm, ofrece una vista bidimensional)
• escaneo EM (superficies de examen, resolución de 7 nm, proporciona una vista tridimensional)

Principio del microscopio electrónico de transmisión (TEM)

Preparación de la muestra: Las celdas se someten a los siguientes pasos para preparar muestras muy finas (de 20 a 100 nm de espesor)

• Fijación: Las células se fijan utilizando glutaraldehído o tetróxido de osmio para la estabilización.
• Deshidración: A continuación, la muestra se deshidrata con disolventes orgánicos (por ejemplo, acetona o etanol).
• Incrustación: La muestra se incorpora a un polímero plástico y luego se cura para formar un bloque sólido. La mayoría de los polímeros plásticos son insolubles en agua; por lo tanto, se requiere una deshidratación completa de la muestra antes de su inclusión.
• Rodaja: Luego, la muestra se corta en rodajas finas con un cuchillo de ultramicrótomo y las rodajas se montan en un portaobjetos de metal (cobre).

Técnica de congelación: Es un método alternativo de preparación de muestras para visualizar orgánulos internos dentro de las células.

Las células se congelan rápidamente, luego se calientan → se fracturan con un cuchillo que expone los orgánulos internos → se someten a sublimación → se cubren con platino y carbono.

Las medidas para aumentar el contraste de EM incluyen:

• Tinción con soluciones de sales de metales pesados ​​como citrato de plomo y acetato de uranilo
• Tinción negativa con metales pesados ​​como ácido fosfotúngstico o acetato de uranilo.
• Sombreado: La muestra se recubre con una película delgada de platino u otro metal pesado en un ángulo de 45 ° para que el metal golpee al microorganismo en un solo lado.