¿Cuál es la diferencia entre Eliseo y Elispot?

Que diferencia principal entre Eliseo y Elispot es que Elisa es un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas que mide la concentración total de proteínas de señalización secretadas, mientras que Elispot es un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas que detecta células secretoras de citoquinas individuales.

Elisa y Elispot son dos ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas que se utilizan ampliamente en medicina, fitopatología, biotecnología y diversas industrias farmacéuticas. En estas técnicas, un analito proteico es detectado por un anticuerpo dirigido contra él. Elisa es el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas más popular utilizado en los laboratorios. Por otro lado, Elispot es una prueba inmunoabsorbente ligada a enzimas que no se usa en lugar de Elisa, pero se usa en laboratorios además de Elisa.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia clave
2. ¿Qué es Eliseo?
3. Qué es Elispot
4. Similitudes - Eliseo y Elispot
5. Elisa vs Elispot en forma tabular
6. Resumen - Eliseo versus Elispot

¿Qué es el Ensayo Elisa?

Elisa es un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas que determina la concentración total de proteínas de señalización secretadas. Es un ensayo bioquímico analítico ampliamente utilizado descrito por primera vez por Engvall y Perlmann en 1971. Esta técnica utiliza un inmunoensayo enzimático de fase sólida para detectar la presencia de una proteína específica en una muestra líquida utilizando anticuerpos dirigidos contra esa proteína específica. Este ensayo es una herramienta de diagnóstico comúnmente utilizada en medicina, fitopatología y biotecnología.

Mecanismo de la prueba ELISA

En la mayoría de las pruebas ELISA, una cantidad desconocida de antígeno se inmoviliza inicialmente en un soporte sólido (placa de microlitros). Luego, el anticuerpo primario apropiado se recubre sobre la superficie del soporte sólido. Este anticuerpo forma un complejo con el antígeno (complejo antígeno-anticuerpo). El anticuerpo primario unido al antígeno puede detectarse mediante un anticuerpo secundario unido a una enzima por bioconjugación. En el último paso de la prueba Elisa, se agrega una sustancia que contiene el sustrato de la enzima. Cuando hay una unión adecuada de un anticuerpo primario al antígeno, el sustrato produce un cambio de color detectable. En última instancia, esto cuantifica el antígeno en la muestra.

Figura 01: Diferentes tipos de Elisa

Además, hay diferentes enfoques de Eliseo, como Eliseo directo y Eliseo indirecto. Actualmente se están utilizando varias pruebas de Elisa para detectar patógenos humanos como, por ejemplo, Tuberculosis micobacterianaRotavirus, virus de la hepatitis B, virus de la hepatitis C, producción de enterotoxinas E. coliVIH y SARS-CoV-2.

¿Qué es el ensayo Elispot?

Elispot es un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas que detecta células únicas secretoras de citoquinas. Cecil Czerkinsky describió por primera vez ELISpot en 1983. Es un tipo de ensayo que se enfoca en medir cuantitativamente la frecuencia de secreción de citoquinas por una sola célula. También se clasifica como una técnica que utiliza anticuerpos para detectar un analito biológico o químico de una proteína. El ensayo Fluorospot es una variación del ensayo Elispot que usa fluorescencia para analizar múltiples analitos (proteínas más misteriosas).

Mecanismo de la prueba Elispot

En este mecanismo, los anticuerpos monoclonales específicos de citocinas se agregan inicialmente a los pocillos de las placas de microlitros. Luego, las células que se desean observar se colocan en los pocillos. Posteriormente se incuban las células. Durante la incubación celular, las células pueden responder a cualquier estímulo y secretar citoquinas. Las citoquinas secretadas por las células incubadas se unen a los anticuerpos porque las células están rodeadas de anticuerpos monoclonales específicos de citoquinas.

Figura 02: Ensayo Elispot

Para detectar estos anticuerpos monoclonales específicos de citocinas, se añaden al pocillo anticuerpos de detección específicos biotinilados. Los anticuerpos de detección específicos biotinilados capturan los anticuerpos monoclonales específicos de citocinas en los pocillos. Además, se añaden conjugados de estreptavidina-enzima a los pocillos para unirse a los anticuerpos de detección. En el paso final, se agregan sustratos específicos a los pocillos. Las reacciones de los conjugados enzimáticos y los sustratos producen distintas tinciones en los pocillos. Estos diferentes puntos se leen en un lector ELISpot automatizado. En última instancia, esto calculará aún más la frecuencia de secreción de citoquinas.

¿Cuáles son las similitudes entre Eliseo y Elispot?

• Ambos son ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas.
• Ambos ensayos detectan analitos proteicos específicos.
• Estos ensayos utilizan anticuerpos específicos para identificar los analitos de proteínas.
• Ambos ensayos usan enzimas y sustratos.
• Se utilizan como herramienta de diagnóstico en laboratorios médicos.

¿Cuál es la diferencia entre Eliseo y Elispot?

Elisa es un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas que determina la concentración total de proteínas de señalización secretadas. Por otro lado, Elispot es un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas que mide células únicas secretoras de citoquinas. Entonces esta es la principal diferencia entre Eliseo y Elispot. Además, con la prueba de Elisa, primero se inmoviliza el antígeno en los pocillos de microlitros. Por el contrario, con la prueba Elispot, el anticuerpo se inmoviliza primero en los pocillos de microlitros. Así que esta es otra diferencia entre Eliseo y Elispot.

La siguiente infografía presenta un análisis detallado de la diferencia entre Elisa y Elispot en forma tabular.

Resumen: Eliseo contra Elispot

Elisa y Elispot son dos ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas que se utilizan ampliamente en medicina, fitopatología, biotecnología y diversas industrias farmacéuticas. Elisa detecta la presencia de un ligando (proteína) en una muestra líquida utilizando anticuerpos dirigidos contra el ligando a medir. El ensayo Elispot es un método ampliamente utilizado para monitorear las respuestas inmunitarias. Reconoce células secretoras de citoquinas individuales usando anticuerpos. Es tanto un inmunoensayo como una técnica de bioensayo. Entonces, este es el resumen de la diferencia entre Eliseo y Elispot.

Relación:

1. Horlock, Claire. "Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA)." Sociedad Británica de Inmunología.
2. "ELISPOT". Temas de ScienceDirect.

Imagen de cortesía:

1. "Tipos ELISA" por Allan.richard5093 - Trabajo propio (CC BY-SA 4.0) a través de Commons Wikimedia
2. "ELISPOT-en" por DadOfBeanAndBug: este archivo se derivó de: ELISPOT.png (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia