Diferencia entre el fragmento Klenow y la ADN polimerasa 1

Que diferencia principal se encuentra entre el fragmento Klenow y la ADN polimerasa 1 El fragmento Klenow es una gran parte de la ADN polimerasa 1 que carece de actividad de exonucleasa de 5 'a 3', mientras que la ADN polimerasa es una enzima de E. coli que tiene los tres dominios, incluida la actividad de exonucleasa 5 'a 3'.

La ADN polimerasa es una de las enzimas clave involucradas en la replicación del ADN en los organismos vivos. Existen diferentes formas de la enzima ADN polimerasa en eucariotas y procariotas, según el tamaño y la forma. La ADN polimerasa 1, 2 y 3 se encuentran solo en organismos procarióticos y desempeñan funciones distintas en la replicación del ADN. La ADN polimerasa 1 tiene tres dominios con actividad de exonucleasa de 5' a 3', actividad de exonucleasa de 3' a 5' y actividad de exonucleasa de 5' a 3'. El fragmento Klenow es un producto proteolítico de la ADN polimerasa 1. Posee actividades de polimerasa 5' a 3' y exonucleasa 3' a 5' de la ADN polimerasa 1 intacta, pero carece de la actividad exonucleasa 5' a 3'.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia clave
2. ¿Qué es el fragmento de Klenow?
3. ¿Qué es la ADN polimerasa 1?
4. Similitudes entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1
5. Comparación lado a lado: fragmento de Klenow frente a ADN polimerasa 1 en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es el fragmento de Klenow?

El fragmento Klenow es una parte importante de la ADN polimerasa 1. A diferencia de la ADN polimerasa 1, no se observa actividad de exonucleasa de 5' a 3' en el fragmento de Klenow porque tiene ausente el dominio de exonucleasa directa de 5' a 3'. Los fragmentos de Klenow se fabrican al digerir la ADN polimerasa 1 con una proteasa llamada subtilisina, una enzima que digiere proteínas. En algunas aplicaciones, la actividad exonucleasa 3' a 5' del fragmento Klenow se vuelve indeseable. Puede eliminarse introduciendo una mutación en el gen que codifica el fragmento Klenow. La enzima resultante, que solo tiene actividad de polimerasa de 5' a 3', se conoce como fragmento exo-Klenow. Morfológicamente, el fragmento de Klenow se asemeja a la mano derecha humana. Tiene un dominio de exonucleasa 3'-5' N-terminal y el dominio de polimerasa C-terminal separados por aproximadamente 30 Å.

El fragmento de Klenow es una herramienta importante en las técnicas de biología molecular. Los fragmentos de Klenow tienen múltiples usos. Son extremadamente importantes en la clonación de extremos romos para crear fragmentos romos. Los fragmentos de Klenow pueden quitar voladizos de 3' o rellenar voladizos de 5' para formar extremos romos. Además, los fragmentos de Klenow se utilizan para sintetizar ADN bicatenario a partir de cadenas sencillas. Además, se usan para generar sondas marcadas radiactivamente usando actividad de polimerasa de ADN dependiente de ADN de 5' a 3'.

¿Qué es la ADN polimerasa 1?

La ADN polimerasa 1 (Pol 1) es una enzima que se encuentra en los procariotas y es necesaria para la replicación del ADN bacteriano. Es el primer tipo de ADN polimerasa descubierto por Arthur Kornberg en 1956. Pol 1 es la polimerasa más abundante en E. coli. Está codificado por el gen polA y consta de 928 aminoácidos. Consta de tres dominios. Los tres dominios cumplen funciones diferentes. Dos dominios realizan actividad de exonucleasa de 5' a 3' y actividad de exonucleasa de 3' a 5'. Debido a esta actividad que posee Pol 1, es más popular como enzima reparadora del ADN que como enzima replicante del ADN. El tercer dominio tiene la capacidad de catalizar múltiples polimerizaciones (5' a 3') antes de liberar la plantilla de ADN y unir los fragmentos de Okazaki completando el nuevo ADN y eliminando los cebadores de ARN.

Pin 1 aislado apagado E. coli ha sido ampliamente utilizado en aplicaciones moleculares. Sin embargo, cuando se descubrió la polimerasa Taq, reemplazó a esa E. coli Polo 1 en tecnología PCR. Taq polimerasa es un tipo de ADN polimerasa termoestable que pertenece a Pol 1.

¿Cuáles son las similitudes entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1?

• El fragmento Klenow es una gran parte de la ADN polimerasa 1.
• Tienen una actividad de polimerasa de ADN dependiente de ADN de 5' a 3' y una actividad de exonucleasa de 3' a 5' que median en la corrección de pruebas.
• Se utilizan para múltiples propósitos.

¿Cuál es la diferencia entre el fragmento Klenow y la ADN polimerasa 1?

La principal diferencia entre el fragmento Klenow y la ADN polimerasa 1 es que el fragmento Klenow carece de actividad de exonucleasa de 5' a 3', mientras que la ADN polimerasa 1 tiene actividad de exonucleasa de 5' a 3'. Por lo tanto, el fragmento Klenow tiene dos dominios, mientras que la ADN polimerasa 1 tiene los tres dominios.

Resumen: fragmento de Klenow frente a ADN polimerasa 1

La ADN polimerasa 1 es una enzima de E. coli que tiene tres dominios como dominio de polimerización de 5' a 3', dominio de exonucleasa de 3' a 5' y dominio de exonucleasa de 5' a 3'. El fragmento Klenow es una gran parte de la ADN polimerasa. Carece de un dominio de ADN polimerasa 1, a saber, el dominio de exonucleasa 5'-3'. La diferencia clave entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1 es que los fragmentos de Klenow no tienen un dominio de exonucleasa de 5' a 3', mientras que la ADN polimerasa 1 tiene un dominio de exonucleasa de 5' a 3'.

Relación:

1. “ADN polimerasa I: una descripción general | Temas de Sciencedirect”. Sciencedirect.Com, 2020, disponible aquí.
2. "Fragmento de Klenow". En.Wikipedia.Org, 2020, Disponible aquí.

Imagen de cortesía:

1. "Dominios de polimerasa" de (desconocido) "Molécula del mes", marzo de 2000 - Banco de datos de proteínas, (Dominio público) a través de Commons Wikimedia
2. "ADN polimerasa" Por Yikrazuul - Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia

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