Principio de la cromatografía en columna

La cromatografía en columna es una técnica ampliamente utilizada para la separación o purificación de los componentes de la muestra. La adsorción del soluto de la solución a través de una fase estacionaria y separa la mezcla en cada analito, depende de la afinidad entre la fase móvil y la fase estacionaria. Las moléculas que tienen menos afinidad hacia la fase estacionaria se separan temprano y las moléculas con más afinidad que se separan más tarde. La fase móvil y la fase estacionaria son las dos fases de la cromatografía en columna en las que la fase móvil es líquida y se utiliza la fase estacionaria sólida. La mezcla de muestra pasa a través de la fase estacionaria con la fase móvil y separa la muestra en función de la afinidad de cada componente por la sílice. El método húmedo y seco utilizado para la preparación de columnas.

Método seco:
En el método seco, la columna se rellena con sílice seca y la fase móvil pasa a través de ella hasta que la sílice se humedece y decanta adecuadamente. En este método de cromatografía en columna, la columna siempre debe estar humedecida con el solvente hasta el final del trabajo.

Método húmedo:
En el método húmedo primero se hace una suspensión de sílice y solvente, luego con la ayuda de un embudo se inserta en la columna, también se debe sedimentar y humedecer hasta el final.
En algunas aplicaciones, se utilizan diferentes tipos de cromatografía en columna, como la cromatografía de adsorción, la cromatografía de intercambio iónico, la cromatografía de partición y la cromatografía en gel, y funcionan según el mismo principio de la cromatografía en columna (adsorción).