Observando el microorganismo

Parte 2 – COLORES

Los microorganismos se observan y estudian utilizando microscopios. Sin embargo, las bacterias tienen casi el mismo índice de refracción que el agua, lo que las hace visualmente opacas. Por lo tanto, las células microbianas se tiñen rutinariamente para un examen microscópico claro. Así, la tinción es una técnica auxiliar utilizada en microscopía y microbiología para potenciar el contraste en las imágenes microscópicas de los microorganismos. Hoy en día se dispone de diferentes tipos de tinción y procedimientos de tinción para estudiar las múltiples propiedades de los diferentes microorganismos.

Los colorantes utilizados en diversos procedimientos de tinción son una solución acuosa o alcohólica de sustancias químicas conocidas como: tintesque puede ser naturales o sinteticos. estos puntos adjuntar a la celda y darle color y contraste, haciendo que la celda sea más visible. Las manchas pueden ser ácidas, básicas o neutras. Los colorantes ácidos como el ácido pícrico, la fusquina ácida, la eosina, etc. tiñen los componentes citoplasmáticos de las células que son de naturaleza básica, mientras que los colorantes básicos como el azul de metileno, el violeta cristal, la safranina, etc. tiñen los componentes ácidos de la célula como ácidos nucleicos. ácidos. Debido a que la célula bacteriana tiene una carga ligeramente negativa en la superficie a un pH neutro (pH 7), los colorantes básicos tiñen las células bacterianas en su conjunto.

El proceso de tinción básico consiste en fijar o montar la muestra en el portaobjetos, sumergir la muestra en la solución de tinción durante un período de tiempo y luego enjuagar y observar la muestra bajo el microscopio. Algunos procedimientos de tinción involucran un químico adicional llamado mordente se agrega a la tinción, aumentando la interacción entre la célula y el tinte, formando un precipitado coloreado insoluble, que se retiene incluso después de que el tinte se haya eliminado de la célula.

Existen básicamente dos tipos de procedimientos de tinción, simples y diferenciales.

La tinción simple es la tinción más básica que se realiza para determinar la forma, el tamaño y la disposición de las células bacterianas. Esta técnica de tinción tiñe la célula bacteriana. Se puede realizar con colorantes base con diferentes tiempos de exposición. La tinción negativa también es una técnica de tinción simple que proporciona la técnica más simple y probablemente la más rápida para obtener información sobre la forma celular, la rotura celular y las inclusiones refráctiles en células como gránulos y endosporas de azufre y poli-β-hidroxibutirato. Las bacterias se vuelven incoloras contra un fondo coloreado en tinción negativa. Los colorantes utilizados en la tinción negativa suelen ser de naturaleza aniónica y, por lo tanto, son repelidos por el citoplasma cargado negativamente, dejando las células sin teñir.

Tinción diferencial es un término amplio utilizado para describir los procesos de tinción que utilizan más de una tinción química. La tinción diferencial implica el uso de una variedad de tintes para teñir los diferentes orgánulos celulares en función de las diferencias estructurales y de composición. Este tipo de tinción ayuda a identificar y categorizar las células en diferentes grupos. Varias técnicas de tinción diferencial utilizadas en estudios microbianos son:

1. tinción de Gram
2. Coloración acidorresistente
3. tinción de endosporas
4. Coloración de la cápsula
5. Tinción de flagelos
6. mancha de la pared celular
7. Tinción de material nuclear

Puntos para recordar:

• Una mancha es una sustancia química que se adhiere a las estructuras del microorganismo y en realidad tiñe el microorganismo para que el microorganismo pueda verse fácilmente bajo un microscopio.
• Colorantes básicos como azul de metileno, violeta cristal, safranina y verde malaquita. son catiónicos, tienen carga positiva y tiñen los cromosomas y las membranas celulares de muchas bacterias.
• Las tinciones ácidas como la eosina y el ácido pícrico son aniónicas, tienen carga negativa y tiñen el material citoplasmático y los orgánulos o inclusiones.
• Una tinción diferencial consta de dos o más colorantes y se utiliza en el procedimiento para identificar bacterias.
• Las tinciones diferenciales más utilizadas para la identificación bacteriana son la tinción de Gram, la tinción acidorresistente de Ziehl-Nielsen y la tinción de endosporas.