La HPLC está bien establecida como técnica analítica. ¿Por qué HPLC es la técnica más popular en los laboratorios analíticos en la actualidad? señala las razones que justifican esta afirmación. La gran cantidad de información puesta a disposición por los detectores de HPLC de uso común puede enriquecerse aún más con los detectores sensibles a las masas.
La idea detrás de escribir este artículo no es socavar las contribuciones de los detectores de HPLC convencionales, sino enfatizar los beneficios adicionales de los detectores sensibles a las masas. Una revisión del artículo sobre los fundamentos de la espectroscopia de masas le ayudará a apreciar las capacidades y el potencial de los detectores sensibles a las masas.
LC-MS ha demostrado ser una de las técnicas más sensibles para la separación e identificación de compuestos orgánicos. La cromatografía líquida ofrece una amplia gama de posibilidades para la separación de mezclas de compuestos a través de la selección de mezclas de fase móvil, tamaños de columna, elección de opciones de fase estacionaria y varios detectores. Los detectores LC convencionales distinguen entre los diferentes componentes de la muestra en función del tiempo de retención y los cuantifican en función de la altura o el área del pico. Esto funciona absolutamente bien para los componentes que producen picos bien separados, pero la cuantificación se vuelve difícil cuando diferentes componentes eluyen cerca unos de otros o incluso eluyen juntos.
Lectura relacionada:¿Cómo evitar averías en los instrumentos de laboratorio?LC - MS es de gran ayuda en separaciones tan exigentes, ya que los espectros de masas reflejan las intensidades de los fragmentos de masa individuales que se ionizan y separan en función de las relaciones masa-carga. En pocas palabras, LC-MS ofrece lo mejor de las técnicas de cromatografía líquida y espectroscopia de masas, demostrando ser muy útil para resolver componentes de muestra estrechamente divergentes. Además, los otros beneficios que ofrece combinar LC con detección masiva son:
Alta resolución
La separación basada en relaciones masa-carga de especies ionizadas complementa la separación de compuestos mediante separaciones en columna cromatográfica
Huellas dactilares de conexiones
La asignación fiable de picos en presencia de matrices de muestras complejas es posible gracias a la toma de huellas dactilares de moléculas debido a fragmentaciones moleculares precisas en condiciones operativas controladas
Lectura relacionada:¿Cómo prevenir la rotura de la cristalería de laboratorio?Determinación de masa molecular
La técnica proporciona valores precisos de los pesos moleculares de los fragmentos de masa molecular tanto originales como ionizados.
Aclaración Estructural
Las condiciones de fragmentación controladas permiten la elucidación estructural de las moléculas originales o ionizadas
Cuantificación
Se pueden obtener altos niveles de precisión mediante el análisis LC-MS.
Lectura relacionada:Discriminación y análisis de masas en espectroscopia de masasEstá claro que LC-MS es capaz de proporcionar múltiples detalles de muestra adicionales de lo que es posible usando solo detectores convencionales. El factor limitante es el mayor costo del detector MS junto con los costos operativos adicionales. Los beneficios ofrecidos superan con creces los costos adicionales cuando se hacen necesarias separaciones y cuantificaciones exigentes.