Diferencia entre radioinmunoensayo y ensayo inmunorradiométrico

Que diferencia principal entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico es que en el radioinmunoensayo la muestra o compuesto a medir se combina con un antígeno radiactivo antes de la combinación, mientras que en el ensayo inmunorradiométrico la muestra o compuesto se combina inmediatamente con los anticuerpos marcados radiactivamente.

Un inmunoensayo es una prueba bioquímica que detecta la presencia o concentración de macromoléculas en una solución usando un anticuerpo o antígeno. Los anticuerpos fluorescentes y radiactivos se utilizan para medir antígenos en una muestra. Inicialmente, los anticuerpos se utilizaron en técnicas de precipitación como la inmunoprecipitación, la inmunodifusión y la inmunoelectroforesis para el análisis de proteínas séricas. Actualmente, se utilizan técnicas altamente sensibles como el radioinmunoensayo y los ensayos inmunorradiométricos para medir fármacos, marcadores tumorales y hormonas.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia clave
2. ¿Qué es un ensayo de radioinmunoensayo?
3. ¿Qué es un ensayo inmunorradiométrico?
4. Similitudes - Radioinmunoensayo y ensayo inmunorradiométrico
5. Radioinmunoensayo versus ensayo inmunorradiométrico en forma tabular
6. Resumen - Radioinmunoensayo vs. Ensayo inmunorradiométrico

¿Qué es un ensayo de radioinmunoensayo?

El radioinmunoensayo (RIA) es un inmunoensayo que utiliza elementos radiactivos para formar secuencialmente complejos antígeno-anticuerpo. RIA generalmente usa anticuerpos radiactivos para detectar la cantidad de antígeno en una muestra. RIA es muy específico y altamente sensible. in vitro Prueba. El principio detrás de RIA es la vinculación competitiva. Un antígeno radiactivo compite con un antígeno no radiactivo por una cantidad constante de sitios de unión a anticuerpos o receptores. RIA requiere permisos y precauciones especiales porque utiliza sustancias radiactivas y sigue siendo una de las técnicas más rentables.

Figura 01: Inmunoensayo

Durante la RIA, una cantidad conocida de antígeno a menudo se vuelve radiactiva marcándola con isótopos de yodo radiactivos gamma unidos a tirosina. Luego, este antígeno se combina con una cantidad conocida de anticuerpo. Tanto el antígeno como el anticuerpo se unen específicamente entre sí. Luego se agrega una muestra de suero sanguíneo para inducir una reacción de competencia entre los antígenos marcados y los antígenos no marcados en el suero con anticuerpos específicos. En esta reacción, los anticuerpos liberan una cierta cantidad de antígeno marcado. Esta cantidad es proporcional a la relación entre el antígeno marcado y el no marcado. Finalmente, se construye una curva de unión para derivar la cantidad de antígeno en el suero sanguíneo de un paciente.

¿Qué es un ensayo inmunorradiométrico?

El ensayo inmunorradiométrico (IRMA) es un inmunoensayo que utiliza anticuerpos radiomarcados. Con IRMA, los anticuerpos se marcan con radioisótopos. Estos anticuerpos se unen a los antígenos presentes en una muestra determinada. En una muestra positiva, los anticuerpos radiomarcados se unen a los epítopos libres de los antígenos. Esto forma un complejo antígeno-anticuerpo.

Durante la segunda reacción, los anticuerpos marcados no unidos se eliminan con un antígeno en fase sólida. El número de anticuerpos radiactivos que quedan en la solución es una función directa de la concentración de antígeno. IRMA se conoce como un ensayo de exceso de reactivo en el que se utiliza como reactivo una cantidad excesiva de anticuerpo radiomarcado. Aquí es donde se permite que reaccione una concentración excesiva de anticuerpo o antígeno marcado. Como paso final, los anticuerpos unidos al antígeno y libres se separan y la fracción unida al antígeno se somete a ensayos radiactivos. La actividad de la fracción es directamente proporcional a la concentración del antígeno.

¿Cuáles son las similitudes entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico?

• Tanto el radioinmunoensayo como el ensayo inmunorradiométrico son inmunoensayos que utilizan elementos radiactivos en la formación secuencial de complejos antígeno-anticuerpo.
• Forman un complejo antígeno-anticuerpo.

¿Cuál es la diferencia entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico?

El radioinmunoensayo es un inmunoensayo que determina los niveles de anticuerpos por un antígeno marcado con un radioisótopo, mientras que el ensayo inmunorradiométrico es un ensayo de exceso de reactivo que utiliza una concentración en exceso de un anticuerpo radiomarcado. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico. IRMA ofrece mayor sensibilidad que RIA. En RIA, los antígenos se marcan con isótopos de yodo radiactivos gamma, mientras que en IRMA, los anticuerpos se marcan con isótopos de yodo. Entonces, esta también es una diferencia entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico. Debido a que IRMA es una técnica de exceso de reactivo, el ensayo se realiza en menos tiempo que RIA.

La siguiente tabla resume las diferencias entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico.

Resumen - Radioinmunoensayo vs. Ensayo inmunoradiométrico

El radioinmunoensayo es un inmunoensayo que utiliza elementos radiactivos en formación secuencial para determinar los niveles de anticuerpos. RIA generalmente usa anticuerpos radiactivos. Un antígeno radiactivo compite con un antígeno no radiactivo por una cantidad constante de sitios de unión a anticuerpos o receptores. El ensayo inmunorradiométrico es un inmunoensayo realizado para determinar los niveles de antígeno en una muestra utilizando anticuerpos radiomarcados. Estos anticuerpos se unen a los antígenos presentes en una muestra determinada. Al final de cada ensayo, se forma un complejo antígeno-anticuerpo. Se dibuja una curva de unión para obtener los resultados de los ensayos. En un radioinmunoensayo, la cantidad de antígeno marcado es proporcional a la relación entre el antígeno marcado y el no marcado, pero en un ensayo inmunorradiométrico, la actividad de la fracción unida al antígeno es directamente proporcional a la concentración del antígeno. Este es el resumen de la diferencia entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico.

Relación:

1. "Radioinmunoensayos (RIA)". Perkin Elmer.
2. WOODHEAD, JS, ADDISON, GM, HALES, CN (1974). El ensayo inmunorradiométrico y técnicas afines. Boletín Médico Británico, 30(1), 44-49. doi:10.1093/oxfordjournals.bmb.a071166

Imagen de cortesía:

1. "Inmunoensayo" por Gringer - Trabajo propio (CC0) a través de Commons Wikimedia