¿Cuáles son los tampones comunes utilizados en HPLC?

La cromatografía líquida de alto rendimiento se utiliza para separar moléculas; depende de su afinidad hacia la fase estacionaria. La forma simétrica del pico es un objetivo final de la cromatografía, por lo que requiere la fase móvil adecuada, a veces requiere una solución tampón para separar los analitos. Un tampón es sólo algo que resiste el cambio, y una solución tampón es una solución que resiste el cambio de pH de una solución al añadir un ácido o base minúsculo. Por ejemplo, en HPLC, si el pH puede cambiarse añadiendo una muestra a una fase móvil, se puede añadir un tampón a la fase móvil para resistir los cambios de pH, esto da el control del pH.

Dado que el tiempo de retención (RT) de las moléculas ionizables es extremadamente sensible al pH de la fase móvil, es necesario controlarlo mediante la adición de tampón. Existen diferentes tipos de tampones que se utilizan en la cromatografía líquida de alto rendimiento, pero el fosfato y el acetato son los tampones más populares para HPLC con detección UV. Normalmente, un rango de pH tampón de 2,00 a 8,00 y una concentración de 10 a 50 mM es adecuada para la separación de analitos en la columna HPLC basada en sílice.

A continuación se mencionan algunos tampones que se utilizan habitualmente en el desarrollo del método HPLC.

pKa	Tampones comunes de HPLC	El rango de pH
4.8 y 9.2	Acetato de amonio	3,8 a 5,8 y 8,2 a 10,2
2.1	KH2PO4 o ácido fosfórico	1.1 a 3.1
3.8 y 9.2	Formato de amonio	2,8 a 4,8 y 8,2 a 10,2
7.2	KH2PO4 o K2PO4	6.2 a 8.2
9.2	Amoníaco o hidróxido de amonio	8.2 a 10.2
4.8	Ácido acético o acetato de potasio	3,8 a 5,8
<2	Ácido trifluoroacético	1,5 a 2,5
9.2	Borado	8.2 a 10.2
3.8	Ácido fórmico	2,8 a 4,8