Volumen de inyección en HPLC

Inyectar muestras en el inyector HPLC es muy sencillo; esto se hace mediante una jeringa manual o una inyección de muestreo automático. Los bucles de muestra Rheodyne y el muestreo automático tienen volúmenes fijos o variables (0,1 – 100 μL) que pueden inyectarse en la columna HPLC. El área y altura del pico aumentan en proporción al volumen de inyección de la solución de muestra. Cuando el volumen de inyección es demasiado alto, el resultado en el pico se amplía y la ampliación de este pico puede reducir la resolución entre picos adyacentes. El volumen de inyección debe elegirse de acuerdo con la geometría de la columna. Podemos utilizar un volumen entre el 1 y el 5% del volumen fallecido de la columna como carga máxima de inyección por columna; sin embargo, esto debemos determinarlo. Los mejores volúmenes de inyección están relacionados con el volumen de la columna HPLC y, como resultado, dependen de la longitud de la columna y del área de la sección transversal.

Aquí se menciona un rango de volumen aproximado del componente de la muestra si se prepara en la misma fase móvil que se utiliza en el sistema.

Identificador de columna	Longitud de la columna	Volumen de inyección
2,1 mm	30 a 100 mm	1 a 3 µl
3,0 a 3,2 mm	50 a 150 mm	2 a 12 µl
4,6 mm	50 a 150 mm	8 a 40 µl
10 mm	50 a 250 mm	40 a 100 µl
21,2 mm	50 a 250 mm	150 a 300 µl
30 mm	50 a 250 mm	300 a 700 µl
50 mm	50 a 250 mm	1000 a 2000 µl