¿Qué es HPLC y Cómo funciona?

HPLC (Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia) es una técnica empleada para separar los componentes de una mezcla. Consiste en una columna como fase estacionaria, que es no polar, y una fase móvil. La fase móvil actúa como portadora de la muestra, la cual se inyecta en la columna. Los componentes de la solución se desplazan en función de las interacciones no covalentes entre los compuestos. Estas interacciones químicas determinan la separación de los contenidos presentes en la muestra.

¿EN QUÉ CONSISTE?

En la cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC), se hace pasar un disolvente líquido que contiene la mezcla de moléculas a identificar a través de una columna que está densamente empaquetada con pequeñas esferas de resina insoluble. Es necesario utilizar bombas de alta presión de precisión, debido a que la resina está densamente empaquetada y el líquido debe ser bombeado a través de la columna a una presión elevada.

Físicamente, una columna de HPLC es un tubo de acero inoxidable con un diámetro interno uniforme, en el cual se encuentra la fase estacionaria.

¿PARA QUÉ SE UTILIZA?

Esta técnica permite estudiar sustancias como aminoácidos, carbohidratos, terpenoides, plaguicidas, esteroides, hidrocarburos, drogas, proteínas, antibióticos, compuestos orgánicos metálicos, especies inorgánicas y otros.

Un poco de Historia

La primera publicación sobre algo similar a un HPLC ocurrió a mediados de la década de 1960, cuando investigadores de la Universidad de Yale (New Haven, EE. UU.) publicaron un estudio en el que utilizaron una bomba para acelerar el flujo de la fase móvil a través de la columna.

A principios de la década de 1970, la empresa Waters Associates, fundada por Jim Waters, comenzó a comercializar las primeras versiones de HPLC. Estos instrumentos tuvieron una gran aceptación, ya que mejoraron significativamente los tiempos de análisis de la cromatografía líquida gracias a la incorporación de una bomba de alta presión, que permitía que la fase móvil se moviera a una velocidad mucho más alta de lo que era común en esa época.

FAQ

¿Qué es el Cromatograma HPLC?

El cromatograma HPLC es el gráfico o registro visual de la separación de los componentes de una muestra utilizando la técnica de HPLC. Proporciona información sobre la retención, el tiempo de retención y la concentración de los componentes presentes en la muestra.

LINKOGRAFÍA:

• https://books.google.com.mx
• https://quimica.unam.mx/investigacion/servicios-para-la-investigacion
• https://apuntesde.es

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