¿Cómo genero resultados cromatográficos auténticos?

Como químico analítico, su principal preocupación es generar datos auténticos que sean universalmente aceptados y reproducibles en condiciones idénticas en cualquier otro laboratorio. Incluso el uso de las herramientas más avanzadas no servirá si se pasan por alto los estándares aceptados a nivel mundial. La idoneidad del sistema es clave para generar datos válidos en el análisis químico.

La cromatografía, especialmente la cromatografía líquida, es la técnica más popular en los laboratorios que se ocupan de productos farmacéuticos, alimentos, medicina forense, polímeros, ciencias de la vida y estudios medioambientales. Solo en la industria farmacéutica de todo el mundo, miles de HPLC trabajan en laboratorios de investigación y desarrollo farmacéuticos y de control de calidad. Cada día se generan enormes cantidades de datos que contribuyen al desarrollo de medicamentos seguros y eficaces para el consumo humano. Dada la seriedad de tales actividades, es primordial que los sistemas de HPLC cumplan con los requisitos de idoneidad del sistema antes de tomar decisiones basadas en dichos datos.

¿Qué es la compatibilidad del sistema?

La prueba de idoneidad del sistema es una parte importante del análisis cromatográfico. Nos ayudan a decidir si la sensibilidad de detección, la resolución y la reproducibilidad son suficientes para el análisis requerido. La Farmacopea de los Estados Unidos (USP) es una fuente autorizada de pautas para la cromatografía de fármacos. La sección 621 USP establece que la prueba de idoneidad del sistema es una parte integral del análisis de cromatografía de gases y líquidos. Las pruebas se basan en el concepto de que el equipo, la electrónica, las operaciones analíticas y las muestras a analizar forman un sistema integral que puede evaluarse como tal. Esto significa que el análisis de muestras solo es aceptable si se cumplen los requisitos de idoneidad del sistema.

Factores que contribuyen a la falla de compatibilidad del sistema en el análisis de HPLC

• Muestreador automático: poca precisión debido a la incapacidad de entregar volúmenes de muestras y estándares establecidos con precisión.
• Columnas: las columnas envejecidas o las columnas obstruidas pueden provocar un rendimiento deficiente debido a la reducción del número teórico de platos.
• Bombas: falta de suministro de un caudal constante de la fase móvil debido al desgaste de las piezas de trabajo
• Errores de fase móvil al realizar mezclas prescritas y desgasificación incompleta
• Preparación de muestras y referencias: imprecisiones en la preparación o falta de filtración antes de la inyección

¿Con qué frecuencia se requiere una prueba de idoneidad del sistema?

De acuerdo con las pautas reglamentarias, la idoneidad del sistema debe calificar todo el sistema cromatográfico y no solo los módulos individuales. Cuando hay un cambio significativo en el equipo o en un sistema de reactivos crítico, se deben realizar pruebas de idoneidad antes de inyectar las muestras. No se acepta ningún análisis de muestra a menos que se cumplan los requisitos de idoneidad del sistema. Los resultados del análisis de muestras obtenidos mientras el sistema está fallando son irrelevantes.

La idoneidad del sistema debe realizarse antes y durante todas las pruebas reglamentadas. No es suficiente realizar pruebas de idoneidad al comienzo de la ejecución cromatográfica y suponer que el sistema funcionará correctamente durante la ejecución. Las mezclas de prueba que contienen componentes principales e impurezas esperadas pueden inyectarse al principio y alternarse durante la prueba.

Si se confronta la idoneidad del sistema, el analista debe detener inmediatamente el análisis. Después de diagnosticar el problema y tomar medidas correctivas, se debe volver a ejecutar la prueba de idoneidad. El análisis de muestras reales no debe reanudarse hasta que se hayan cumplido todos los criterios de idoneidad del sistema, no solo los criterios fallidos.