¿Por qué HPLC es la técnica más popular en los laboratorios analíticos en la actualidad?

La HPLC es una técnica de separación ampliamente utilizada para separar, identificar y cuantificar componentes de mezclas de compuestos orgánicos que se retienen selectivamente en la fase estacionaria de la columna utilizando líquido como fase portadora. Ha encontrado aplicaciones generalizadas en la investigación académica, así como en el monitoreo industrial y el control de calidad.

Si entrara en un laboratorio farmacéutico moderno, probablemente se encontraría con una serie de instrumentos analíticos como el espectrofotómetro UV visible, el espectrofotómetro de absorción atómica, los sistemas GC 5-6, HPTLC, analizadores de tamaño de partículas, pero seguramente verá docenas de los sistemas HPLC frente al futuro. HPLC, sin duda, ha logrado la posición dominante en los laboratorios y sin duda mantendrá esta envidiable posición en el futuro previsible.

¿Alguna vez se ha preguntado qué factores contribuyeron a la creciente popularidad de HPLC? La respuesta está en las aplicaciones y la flexibilidad sin igual que ofrece el científico analítico.

Aplicaciones

HPLC ha encontrado aplicaciones generalizadas en las siguientes áreas clave:

• Medicamentos
• alimento
• polímeros
• Control ambiental
• Investigación forense
• Laboratorios de Bioquímica y Biotecnología

Flexibilidad

La razón principal de la popularidad de HPLC es la facilidad con la que se puede adaptar a las necesidades del analista.

• La elección de disolventes en la fase móvil y la elución isocrática o en gradiente ayuda a aislar e identificar compuestos de diferentes polaridades.
• La gran escala de las separaciones de masas es difícil de encontrar en una sola técnica.

Analítico – pg-ng
Semi Preparativo – g – mg
Preparativo – mg-gms

También es posible cubrir una gran cantidad de compuestos con pesos moleculares que van desde 50 hasta más de 1 millón de daltons.

Fase normal para separación de compuestos no polares con combinación de fases móviles no polares

Fase inversa para la separación de moléculas polares utilizando mezclas de fase móvil acuosa/orgánica

El intercambio iónico utiliza columnas de intercambio iónico para la separación de moléculas cargadas, proteínas, nucleótidos, etc.

La cromatografía de permeación en gel para la separación por tamaño molecular de los compuestos de separación y se ha utilizado para la separación de proteínas y polímeros.

• Elección de fases estacionarias

La mayoría de las fases estacionarias se basan en sílice, pero los desarrollos recientes en nuevos materiales han ampliado aún más el alcance.

La mayoría de las aplicaciones se ejecutan a una presión normal de 2000 a 6000 psi. La cromatografía de ultra alta presión o UHPLC utiliza rangos de presión de 15 000 a 18 000 psi con partículas de menos de 2 m para aumentar la velocidad y la resolución

La amplia selección de detectores ofrece numerosas posibilidades para la detección de un gran número de compuestos con diferentes propiedades estructurales:

1. Detector ultravioleta visible
2. Detector de matriz de fotodiodos
3. detector de fluorescencia
4. Detector de índice reflectante
5. Detector electroquímico:
6. detector de conductividad
7. Detector Sensible a Masas
8. Detectores de dispersión de luz

• Avances recientes en la tecnología HPLC

LC-MS ofrece una combinación incomparable de separación HPLC combinada con alta sensibilidad de detección de espectrómetro de masas

La tecnología de partículas Core Shell ofrece las ventajas proporcionadas por UHPLC sin recurrir a altas presiones

Monolito y Circóna las juntas ofrecen los beneficios de una operación de pH de larga duración y temperaturas superiores a las ambientales

La selección de la longitud y el diámetro de la columna puede optimizar la velocidad del análisis de alta resolución. Con columnas de diámetro estrecho es posible lograr separaciones en cuestión de minutos o segundos en comparación con las columnas convencionales

Estará de acuerdo en que la flexibilidad de la personalización ofrece posibilidades ilimitadas al científico analítico y que HPLC encuentra más y más aplicaciones en diferentes laboratorios todos los días. La cuota global del mercado de HPLC es de aproximadamente 3.000 millones de dólares estadounidenses. La industria farmacéutica por sí sola representa el 35% de la cuota de mercado. Estados Unidos y Europa representan actualmente el 70% de la cuota de mercado mundial. Se espera que la región de Asia y el Pacífico logre el crecimiento más rápido con una tasa de crecimiento compuesta del 7,5 % para el período 2000-2015.

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