Buffers compatibles con LC-MS

Los disolventes o fase móvil se suelen seleccionar en función de la solubilidad y compatibilidad de un compuesto con diversas técnicas de ionización utilizadas en LC-MS. La volatilidad y la capacidad de un disolvente para dar un protón son importantes en la ESI y en otros métodos de ionización atmosférica. Se tendrán en cuenta las consideraciones especiales a la hora de seleccionar un tampón para aplicaciones de cromatografía líquida-espectrometría de masas. Los tampones volátiles son necesarios para evitar el cruce de la interfaz API, un aumento de la concentración de tampones tanto en ESI positivo como negativo puede provocar una disminución de la señal de la molécula. Sin embargo, este efecto depende de algunas moléculas que sólo muestran una pequeña pérdida de respuesta.

A continuación se enumeran los buffers compatibles (volátiles) en LC-MS.

Ácido trifluoroacético (TFA) (pKa-0,2)
Ácido fórmico (pKa-3,8)
Formiado de amonio (pKa-3,8)
Ácido acético (pKa-4,8)
Acetato de amonio (pKa-4,8)
Formiado de amonio (pKa-9,2)
Acetato de amonio (pKa-9,2)
Amoníaco (NH4OH) (pKa-9,8)

El tampón es más eficaz cuando se utiliza en ±1 unidad de pH de su pKa, pero un tampón adecuado del pKa puede proporcionar la unidad de ±2 pH. Utilice siempre soluciones tampón de máxima calidad y filtradas correctamente. Una concentración de tampón de hasta 25 mM será adecuada para el análisis LC-MS. La concentración precisa del tampón depende de los objetivos del análisis, las concentraciones más bajas del tampón aumentarán normalmente la vida útil de la columna. Se recomienda evitar el uso de tampón fosfato en el análisis de LC-MS, puesto que tiene una baja volatilidad.