Cromatografía de partición | Principio, procedimiento, aplicaciones y tipos

La cromatografía de partición es uno de los tipos de cromatografía introducidos en la década de 1940 por Richard Laurence Millington Synge y Archer Martin.

Definición de cromatografía de partición

La definición de cromatografía de partición establece que es una técnica utilizada principalmente para la separación de los componentes presentes en la mezcla en dos fases líquidas que son el solvente original y el solvente de recubrimiento utilizado en la columna.

Cromatografía de partición y adsorción

Cromatografía de adsorción es otro tipo de cromatografía en el que las moléculas disueltas (gas o líquido) se adsorben directamente en la superficie de la fase estacionaria.

¿Qué es un cromatograma y cómo leo un cromatograma?

Cromatografía de partición y adsorción: similitudes

• Ambos son tipos de cromatografía que funcionan con el mismo principio.
• Ambos se utilizan para la separación de mezclas de compuestos.
• Ambos pueden separar los componentes en las tres fases, a saber, gas, líquido y sólido.

Cromatografía de partición y adsorción: diferencias

Principio de cromatografía de partición

En la cromatografía de partición, la separación de los componentes de la muestra se produce mediante el proceso de partición de los componentes entre dos fases, donde ambas fases están presentes en forma líquida. En este procedimiento, la superficie sólida inmiscible cubierta con la superficie líquida en la fase estacionaria se encuentra en la fase móvil.

La fase estacionaria inmoviliza la superficie del líquido que eventualmente se convierte en una fase estacionaria. Los componentes se separan de la fase estacionaria justo después del cambio de la fase móvil. La separación se debe a las diferencias en los coeficientes de partición.

Coeficiente de partición en cromatografía

Cuando el flujo de la fase móvil se detiene en cualquier intervalo de tiempo, el soluto adopta una distribución de equilibrio entre las dos fases. En cada etapa, la concentración viene dada por el coeficiente de partición en cromatografía que se representa como k = C_s/C_metro

Jeringas cromatográficas

Aquí, C_s medio Concentración de soluto en la fase estacionaria

C_metro medio Concentración de soluto en la fase móvil.

Las unidades de C_s y C_metro puede ser diferente

¿Cómo genero resultados cromatográficos auténticos?

En una situación en la que el soluto se distribuye por igual entre las dos fases, entonces K = 1.

Procedimiento de cromatografía de partición

Para una comprensión sencilla de la cromatografía de partición, aquí explicamos el procedimiento para realizar la cromatografía en papel.

Dispositivo requerido:

• Tarro de cromatografía
• tubo capilar
• Fase estacionaria
• Fase móvil: cloroformo, metanol, acetona o etanol

Pasos:

1. Selección de un tipo adecuado de desarrollo - Base de solvente, mezcla, complejidad del papel, etc. se selecciona el tipo de revelado. Habitualmente se utiliza la cromatografía en papel ascendente porque es una técnica sencilla de realizar y además los cromatogramas se obtienen rápidamente.
2. Elegir una fase estacionaria – El papel de filtro (fase estacionaria) se selecciona en función del tamaño de poro y la calidad del analito.
3. Preparación de la muestra - La muestra se prepara disolviendo el componente en un disolvente adecuado utilizado durante el procedimiento de producción de las fases móviles.
4. Detectando al monstruo en el papel - La mezcla de muestra se coloca sobre el papel de filtro en un lugar adecuado.
5. Desarrollo del cromatograma - Usando un frasco cromatográfico, el desarrollo del cromatograma se determina sumergiendo el papel en el solvente o fase móvil. Se permite que la fase móvil fluya sobre la muestra de prueba por acción capilar.
6. Secar el papel e identificar las conexiones - Después de desarrollar los cromatogramas, el papel de filtro se seca con un secador de aire. El papel con diferentes bandas de moléculas se puede estudiar en el gabinete UV. También se calculan los valores de Rf.

Tipos de cromatografía de partición

1. Cromatografía líquido-líquido: En este tipo de cromatografía de partición, en lugar de una columna de adsorción, se utiliza una hoja de papel adsorbente. Los componentes se dividen según sus velocidades diferenciales de extracción. Para que los cromatogramas sean visibles, se tiñen después de la separación.
2. Cromatografía gas-líquido: Esto también se denomina cromatografía de partición gas-líquido (GLPC) o cromatografía en fase de vapor. En esta cromatografía de distribución gas-líquido, la separación de la mezcla de muestra se realiza mediante un gas inerte con un tubo. El llenado del tubo es con sólidos inertes finamente divididos recubiertos con aceite no volátil. Dependiendo de la velocidad determinada tanto por la solubilidad del aceite como por la presión de vapor, se produce la migración de cada componente.

Aplicaciones de cromatografía de partición

• Para separar y detectar mezclas de colores, incluidos pigmentos
• Para separar y determinar proteínas, lípidos, alcaloides, glucósidos y otras biomoléculas
• Para aislar y detectar aminoácidos y carbohidratos
• Para investigar la pureza de los medicamentos.
• En la secuenciación de ADN/ARN
• Para determinar contaminantes en alimentos y bebidas.
• Para aislar conexiones polares y no polares.