A continuación se indican los motivos habituales del fronting máximo.
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Sobrecarga de la muestra o de la columna:
El frente de picos muestra si la columna analítica supera la capacidad de muestreo, que puede producirse tanto en separaciones GC como HPLC.
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Poca capacidad de muestra/pico:
Si el analito no tiene una retención suficiente en la columna HPLC, no se produce una separación adecuada.
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Saturación del detector:
De la misma forma que la forma del pico puede cambiar con la sobrecarga de la columna, la sobrecarga del rango de medida del detector también puede provocar una pérdida de saturación y precisión de la señal.
La columna mal empaquetada, la canalización en una columna empaquetada, la trayectoria de entrada del volumen muerto y la fase móvil demasiado débil también son causas del frente de pico.
A continuación se exponen los motivos habituales del pico de cola
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Difusión del camino del flujo:
Los conectores/accesorios mal ajustados, una columna con una línea de conexión capilar de tamaño incorrecto puede provocar un pico de cola.
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Dependencia del pH para moléculas ionizables:
Si existe una diferencia de 2 unidades de pH entre el pKa de la muestra y la fase móvil, y cuando la muestra se ioniza fácilmente, se puede producir el pico de cola.
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Sobrecarga de la muestra o de la columna:
Si la columna no se lava correctamente después de cada análisis, puede formarse con el tiempo y cambiar la química superficial de la fase estacionaria.
Puede haber muchas razones para la cola y la frente. Algunas posibles causas son:
- Efectos de columna adicionales, como la sobrecarga de la columna
- El caudal de la fase móvil es demasiado bajo
- El vacío en la entrada de la columna
- Si la concentración de tampón es demasiado baja
- Cambio en la composición de la fase móvil
- Frito bloqueado
- Columna contaminada
- Muestra que reacciona con los sitios activos
- pH incorrecto de la fase móvil/tampón
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