La separación, la resolución, el tiempo de retención y la eficiencia de la cromatografía en columna depende de distintos factores, algunos de los factores clave incluyen.
La polaridad de la fase móvil: La polaridad de la fase móvil está relacionada con la resolución, el valor Rf y la separación de los analitos, las variaciones drásticas en la polaridad del disolvente pueden afectar al resultado de la cromatografía en columna.
Naturaleza del disolvente: El caudal del disolvente puede verse afectado por su viscosidad. Así, el disolvente tiene una viscosidad baja que es eficiente en comparación con un disolvente más viscoso.
Calidad de los disolventes: Los disolventes de alta calidad pueden dar una reproducibilidad mucho mejor que los disolventes de baja calidad.
Selección de disolventes: Los disolventes o fase móvil utilizados deben ser compatibles con la matriz; en este caso, el TLC es una forma muy eficaz de optimizar la fase móvil.
Velocidad de flujo: Los cambios en el caudal entre los procesos pueden afectar a la eficiencia de la columna; por tanto, los componentes deben aislarse con un caudal adecuado.
Embalaje de la columna: El embalaje de columnas es un aspecto esencial de la resolución, el embalaje adecuado de las columnas es muy crucial para obtener un mejor rendimiento.
Tamaño de la columna: Los cromatógrafos utilizan distintas dimensiones de una columna, depende del proceso y su uso. La longitud, altura y anchura de las columnas son factores importantes para la separación de moléculas, por lo tanto, se deben seleccionar las dimensiones adecuadas de la columna.
El tamaño de partícula del absorbente: El movimiento del adsorbente depende de su superficie, para mejorar la superficie del adsorbente, se puede reducir el tamaño de la partícula y, por tanto, aumenta la actividad del adsorbente.
Presión: El aumento o disminución de la presión entre la separación puede afectar a los resultados.
La temperatura: La temperatura también es un factor importante en la separación cromatográfica porque las variaciones de temperatura pueden afectar al proceso de separación y, en algunos casos, degrada la muestra.
