La columna C8 se utiliza mientras se desea una RT pequeña, si la hidrofobicidad es baja, hay menos tiempo de retención para los analitos no polares, por tanto, los analitos o compuestos no polares se separan más rápidamente con la columna C8. El C8 se selecciona sobre el C18, en la matriz de fase inversa donde el grado de hidrofobicidad es bajo. Sin embargo, la columna C18 es más aceptada y ampliamente utilizada porque el gel de sílice C18 interacciona con el amplio abanico de analitos, por tanto, se utiliza en la separación, estudios cualitativos y cuantitativos en las industrias farmacéuticas, análisis químicos y ciencias ambientales.
La diferencia clave entre la columna C8 y C18 es que la columna C18 consta de 18 carbonos unidos a la sílice que es una cadena de carbono más larga que la C8. Debido a la cadena de carbonos adicionales, el C18 posee una amplia superficie que ofrece un tiempo adicional de reacción entre la fase unida y el compuesto. Como resultado, los compuestos se eluyen más paulatinamente de la columna y hay más aislamiento.
C18: Octadecil silano
C8: Octil silano
En HPLC en fase inversa: la fase móvil es polar y la fase estacionaria no polar.
En HPLC en fase normal: la fase móvil es no polar y la fase estacionaria es polar.
