El inyector de muestras HPLC es una técnica que se utiliza para cargar e inyectar las soluciones de muestra en el sistema HPLC. Este método se realiza mediante un inyector especialmente diseñado que se encuentra antes de la columna HPLC. Existen tres tipos de inyectores disponibles para los sistemas HPLC. Inyector de Rheodyne o inyector de bucle, inyector de septum e inyector de paro de flujo.
Algunos requisitos de la inyección HPLC son:
1. El volumen de inyección debe ser el mismo para todas las muestras de un mismo experimento.
2. Las muestras deben inyectarse sin la presión del sistema perturbador y el caudal de HPLC.
3. La muestra debe estar libre de burbujas de aire.
4. Debe ser preciso, ya que el volumen de la muestra en microlitros (0,1 a 100 microlitros).
5. La solución de muestra debe estar libre de partículas.
6. Un bucle de muestra en la posición de carga se llena con la solución de muestra mientras que el sistema se está equilibrando. Mientras se gira hacia el punto de inyecto, el bucle de muestra se cambia en la parte de alta presión del sistema HPLC. El flujo de la fase móvil entregado por la bomba HPLC a través del bucle y suministra la muestra a la columna cromatográfica.
Rheodyne o inyector de bucle como sistema de inyección HPLC:
Rheodyne es el inyector más popular en cromatografía líquida de alto rendimiento, ya que es un volumen de muestra preciso, reproducible y preciso. Tiene un modo de carga e inyección. La posición de carga permite cargar la solución de muestra en el bucle con la ayuda de jeringuillas. Tras cargar la muestra, el inyector de muestra de rotación manual permite que la muestra fluya sobre una columna sin burbujas de aire, sin alterar la presión (hasta 6000 psi). y el caudal del sistema.
Inyector septum:
En este tipo de inyector, la muestra se inyecta introduciendo la aguja a través del septum de goma.
Inyector de paro de flujo:
El flujo de la fase móvil a través de la columna HPLC se detiene mientras se inyecta la muestra.
Inyector de muestreo automático HPLC:
Actualmente, los sistemas HPLC modernos utilizan muestreos automáticos. La válvula de inyección del automuestredor es similar a la válvula manual; sin embargo, la solución de muestra se inyecta mediante una jeringa automática desde los viales en una bandeja motorizada. Por lo general, los automuestreadores funcionan perforando el vial de muestra con tapa con una aguja y conectándolo a lo largo del tubo flexible. Posteriormente, la muestra se retira del vial al bucle por succión y se inyecta en el bucle, mientras que los analitos se separan por columna y se analizan por el detector (UV/PDA).
