Es uno de los tipos de cromatografía más antiguos y más se utiliza en laboratorios orgánicos en forma de cromatografía en columna y cromatografía de capa fina. La TLC se utiliza para analizar los compuestos y comprobar el progreso de las reacciones y la cromatografía en columna realiza la separación y purificación de los compuestos. En la cromatografía de adsorción, la fase estacionaria es un sólido fino dividido para maximizar la superficie. Los analitos interaccionan de forma diferente con el adsorbente, ya que cada uno tiene una afinidad distinta. Por tanto, separan diferentes tiempos de retención.
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Tabla de contenidos
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Principio de cromatografía de adsorción:
La cromatografía de adsorción funciona sobre el principio de que ciertos materiales sólidos, llamados adsorbentes, pueden retener compuestos en su superficie. Las camas adsorbentes distinguirán entre el adsorbado en función de su fuerza de unión a medida que el eluyente se realiza continuamente sobre la fase estacionaria de la columna; las variaciones en el caudal del compuesto conducen finalmente a la separación de los analitos. Los adsorbentes más utilizados en cromatografía de adsorción incluyen sílice, alúmina y carbón vegetal. En función de su polaridad relativa, el orden de elución de los componentes de la absorción es distinto.
Tipo de cromatografía de adsorción:
Existen tres tipos principales de cromatografía de adsorción, tales como la cromatografía en columna, la cromatografía de capa fina (TLC) y la cromatografía gas-sólido.
Cromatografía en columna es una técnica comúnmente utilizada para separar los compuestos de la mezcla de muestra. Se utiliza en escaneos pequeños o grandes para separar y purificar compuestos. La mezcla de muestras se mueve por la fase estacionaria con la fase móvil y en función de varios grados de adhesión separa a los compuestos.
Cromatografía en capa fina es un método analítico de separación utilizado para el análisis cualitativo y seguimiento de la reacción, así como para la identificación de compuestos desconocidos.
Cromatografía gas-sólido (GC) es un método analítico para la separación de compuestos volátiles en los que la fase móvil es gas y la fase estacionaria es adecuada para soporte sólido. La cromatografía gas-sólido trabaja según el principio de separación es la adsorción y se utiliza generalmente para muestras que tenían menos solubilidad en la fase estacionaria.
Procedimiento de cromatografía de adsorción:
Antes de empezar un experimento de cromatografía de adsorción, debemos reconocer los distintos componentes esenciales para llevar a cabo el proceso.
Fase estacionaria: La fase estacionaria de la cromatografía de adsorción es adsorbente.
Fase móvil: En la cromatografía de adsorción, se utiliza un líquido o gas como fase móvil.
Aparato para el método TLC:
Puede TLC: Ayuda a mantener la atmósfera adecuada durante el aislamiento.
Placa TLC: Se utiliza como fase estacionaria recubierta con una fina capa de sílice, alúmina, sobre plástico de vidrio o aluminio.
Cámara de yodo o cámara UV: Ayuda a visualizar las manchas de la placa de cromatografía de capa fina.
Tubo capilar: Se utiliza para aplicar la mezcla de muestra.
Procedimiento experimental de cromatografía de adsorción:
Diagrama de cromatografía en capa fina:
Procedimiento experimental de cromatografía de adsorción:
Los siguientes pasos están implicados en el proceso de TLC.
- Prepare el contenedor de desarrollo: Verter el disolvente a una profundidad justo por debajo de 0,5 cm dentro de la cámara para saturar aún más con el
- Prepare la placa TLC: Las placas TLC suelen estar disponibles comercialmente; basta con cortarlos en el tamaño requerido.
- Localiza la placa TLC: Sumerja el microcapilar en la solución de muestra y, posteriormente, toque su extremo suavemente en la placa en un lugar adecuado.
- Desarrollar la placa: En la cámara, colocar el plato preparado, cubrir con la tapa y dejar sin tocar. Mediante la acción capilar, el disolvente elevará la placa TLC.
- Visualiza los puntos: Retire la placa de la cámara y, si la placa tiene algunas manchas de colores, márquelas. La mayoría de los analitos no están coloreados y deben visualizarse colocándolos en una cámara de yodo o un armario UV. Por último, calcula los valores de Rf para todos los compuestos separados.
Aplicaciones de la cromatografía de adsorción:
- Se utiliza para la separación de aminoácidos.
- En esta técnica, los analitos se purifican a partir de mezclas de muestras según determinadas propiedades físico-químicas.
- Se utiliza para determinar la concentración de una molécula.
- Se utiliza para la separación e identificación de isómeros.
- La técnica de adsorción es útil para la identificación de hidratos de carbono.
- Se utiliza para la separación e identificación de varias mezclas de compuestos volátiles.
Las ventajas de la cromatografía de adsorción son las siguientes.
- La cromatografía de adsorción es una herramienta importante para separar muchas moléculas que no pueden distinguirse de otros métodos.
- La cromatografía de adsorción utiliza una amplia gama de fases móviles.
- Se utilizan muy pocos tipos de equipos a diferencia de otros métodos de separación.
- Las moléculas de la mezcla compleja pueden separarse fácilmente.
Las desventajas de la cromatografía de adsorción son las siguientes.
- La automatización lo hace más complicado y caro.
- La principal desventaja de la cromatografía de adsorción es que algunos solutos tienen tiempos de retención más largos.
- Puede provocar variaciones catalíticas en la muestra.
- Los resultados obtenidos por algunos métodos de cromatografía de adsorción son difíciles de reproducir.
Las preguntas más frecuentes sobre cromatografía son las siguientes.
¿Cuál es el principio básico de la cromatografía de intercambio iónico?
El intercambio de iones es el principio básico de la cromatografía de intercambio iónico. Los intercambiadores catiónicos y aniónicos son dos formas de cromatografía de intercambio iónico que se utilizan en este proceso.
¿Qué es la cromatografía en columna?
La cromatografía en columna es un método utilizado habitualmente para separar los compuestos de mezclas complejas. La cromatografía, cuando se realiza en columna, se llama cromatografía de columna.
¿Cuál es la diferencia principal entre la cromatografía de afinidad y la de intercambio iónico?
La principal diferencia entre la cromatografía de afinidad y la de intercambio iónico es que la cromatografía de afinidad se utiliza para separar moléculas cargadas o no cargadas, mientras que la cromatografía de intercambio iónico se utiliza para separar moléculas cargadas.
¿Qué tipo de papel se utiliza en la cromatografía de papel?
El papel de filtro, los papeles modificados químicamente, los papeles acetilados y los papeles de celulosa pura de distintos grados como el No.1, 2, 3, 4, 7, 17, 20, 40, 42, etc. se utilizan como fases estacionarias en la cromatografía de papel.
¿Cuál es la principal ventaja del HPLC?
Una de las principales ventajas de la cromatografía líquida de alto rendimiento es que tiene la capacidad de probar una gran variedad de muestras.
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