Principio y procedimiento de la cromatografía en papel

La cromatografía en papel es uno de los tipos de procesos que funcionan sobre un pedazo de papel especial. Es un método de cromatografía plana en el que un papel de filtro de celulosa funciona como una fase estacionaria en la que se separan los compuestos. La cromatografía en papel es la técnica de separación más eficaz, especialmente en el análisis de compuestos químicos y muestras de lípidos. Varios tipos de cromatografía, como la cromatografía líquida, la cromatografía de intercambio iónico, la cromatografía de gases, la cromatografía de capa fina (TLC), la cromatografía en columna y la cromatografía de afinidad, tienen los mismos principios básicos.

En la cromatografía en papel, interviene la cromatografía de adsorción o la cromatografía de partición en la que los componentes se dividen o distribuyen entre fases líquidas. En éste, se utiliza un papel de cromatografía especial en el que queda atrapada agua que es la fase estacionaria. Una solución de muestra se encuentra en la base de la página. En el disolvente adecuado, la tira de papel queda suspendida y la fase móvil sube por acción capilar en la parte superior del papel. Los analitos se mantienen selectivamente en la fase estacionaria (papel de celulosa). Las manchas de distintos analitos se mueven a diferentes alturas a lo largo de la fase móvil y cada componente de la mezcla de muestra se separa en función de distintos grados de adhesión.

Tabla de contenidos ¿Qué es la cromatografía de papel Principio de cromatografía en papel Procedimiento de cromatografía en papel Aplicaciones de la cromatografía en papel Tipo de cromatografía de papel Ventajas de la cromatografía en papel Inconvenientes de la cromatografía en papel

Elija un tipo de desarrollo adecuado: Se decide en función del disolvente, la mezcla, la complejidad del papel, etc. Al ser fáciles de ejecutar, se suele utilizar la cromatografía en papel de tipo radial o ascendente. También es sencillo de manejar, el cromatograma obtenido es más rápido.

Selección de un papel de filtro adecuado: En función de la calidad de la muestra y el tamaño de los poros, se selecciona el papel de filtro.

Preparación de la muestra: La preparación de la muestra implica la disolución de la muestra en un disolvente adecuado que se utiliza en el proceso de fabricación de la fase móvil.

Mancha de muestra en el papel: La mezcla de muestra debe localizarse en una posición adecuada sobre el papel con un tubo capilar.

Desarrollo del cromatograma: El desarrollo de los cromatogramas se observa sumergiendo la fase estacionaria (papel) en la fase móvil. Debido a la acción capilar del papel, el proceso móvil pasa por encima de la muestra de papel.

Secado de papel y detección de compuestos: Tras el desarrollo del cromatograma, el papel se seca con un secador de aire. La solución de detección también se rocía sobre papel desarrollado y se seca para reconocer las manchas del cromatograma de la muestra. Se observa papel con distintas bandas de analitos bajo luz UV y se calculan otros valores de Rf.

• La cromatografía en papel se utiliza para separar compuestos polares y no polares.
• Se utiliza para la detección y separación de mezclas de colores, incluidos los pigmentos, como técnica de química analítica cualitativa.
• La cromatografía en papel se utiliza para identificar azúcares, ácidos nucleicos, lípidos, aminoácidos y otras biomoléculas.
• Se utiliza en la secuenciación de ADN/ARN.
• Se utiliza para probar la pureza farmacéutica.
• Se utiliza para la detección de contaminantes en alimentos y bebidas.
• Para investigaciones y juicios penales, la cromatografía en papel se utiliza en la investigación forense.
• Se utiliza para el estudio de la maduración y fermentación.
• Se utiliza para el análisis de cosméticos.
• La cromatografía en papel se utiliza para la separación y la purificación de componentes.
• La cromatografía en papel puede aplicarse para controlar las reacciones de síntesis química.

Cromatografía de papel ascendente: Como su nombre indica, el disolvente en desarrollo o la fase móvil viaja en dirección ascendente por la acción capilar.

Cromatografía de papel descendente: En esta cromatografía en papel, debido a la atracción gravitatoria, la dirección del flujo de disolvente está hacia abajo

Cromatografía de papel ascendente-descendente: En este tipo de cromatografía en papel, el disolvente se mueve primero hacia arriba sobre el papel plegado sobre una varilla y después de cruzar la varilla continúa su camino hacia abajo.

Cromatografía de papel horizontal o circular: En este método, la mezcla de muestra se utiliza en el centro de un papel redondo colocado sobre una superficie plana.

Cromatografía de papel bidimensional: Con la ayuda de la cromatografía en papel bidimensional, pueden resolverse sustancias que tienen los mismos valores de Rf.

• Los compuestos se separan en poco tiempo.
• El análisis de la cromatografía en papel requirió pequeñas cantidades de muestra.
• Es una técnica económica en comparación con otros métodos cromatográficos.
• Es posible identificar tanto compuestos orgánicos como inorgánicos.
• La cromatografía en papel es fácil de utilizar y configurar.

• El uso de técnicas de cromatografía en papel no puede separar substancias volátiles.
• La cromatografía en papel no puede separar grandes volúmenes de muestra.
• La cromatografía en papel tiene menor precisión en comparación con TLC, HPTLC y HPLC.
• No es capaz de separar la compleja mezcla.
• No puede guardar los resultados durante largos períodos.

El principio implicado es la cromatografía de partición en la que los compuestos se distribuyen o dividen en fases líquidas.

La cromatografía en papel es un método para separar e identificar mezclas especialmente pigmentos.

Las principales ventajas de la cromatografía en papel son la sencillez, separación rápida, bajo coste y buena sensibilidad.

El papel de filtro, los papeles modificados químicamente, los papeles acetilados y los papeles de celulosa pura de distintos grados como el No.1, 2, 3, 4, 7, 17, 20, 40, 42, etc. se utilizan como fases estacionarias en la cromatografía de papel.

La principal diferencia entre la TLC y la cromatografía en papel es que la fase estacionaria de la cromatografía en papel es papel de celulosa mientras que la TLC utiliza una fina capa de sílice o alúmina apoyada sobre una superficie plana.