Cromatografía de papel ascendente y descendente

La mezcla de disolventes sube por acción capilar a través de la fase estacionaria. La muestra concentrada se aplica en la parte inferior del papel de filtro en forma de punto minuto. A medida que la fase móvil líquida se mueve hacia el papel de filtro, la mezcla de muestra manchada viaja paulatinamente junto con la fase móvil. Esto se traduce finalmente en la separación de los solutos. Los solutos de la mezcla de muestras se separarán según su capacidad de solubilidad. En otras palabras, es la polaridad como la cromatografía de columna abierta. Las moléculas con menor polaridad viajarán más rápido, mientras que las moléculas más polares viajan más lentamente. Cada punto separado tiene su propio valor Rf. El factor de retención (valor Rf) significa la relación entre la distancia de migración de un soluto y la distancia de migración del frente del disolvente.

Tabla de contenidos Principio de cromatografía en papel Tipo de cromatografía de papel Cromatografía ascendente Principio de la cromatografía ascendente Procedimiento de cromatografía ascendente Cromatografía descendente Principio de la cromatografía descendente Procedimiento de cromatografía descendente Diferencia entre cromatografía de papel ascendente y descendente

Existen cinco tipos de cromatografía en papel disponibles basadas en el desarrollo de cromatogramas.

1. Cromatografía ascendente

2. Cromatografía descendente

3. Modo ascendente- descendente

4. Modo radial

5. Cromatografía bidimensional

En este artículo estamos discutiendo la cromatografía de papel ascendente y la cromatografía de papel descendente.

La cromatografía ascendente es un método de separación de la cromatografía de papel en la que el disolvente viaja por la fase estacionaria contra la gravedad. El desarrollo del cromatograma es causado por el movimiento ascendente de la fase móvil sobre el papel. La parte inferior del papel está inmersa en la fase móvil, pero las manchas permanecen justo por encima de la fase móvil. Los analitos se separan porque cada molécula tiene una afinidad distinta por la fase estacionaria.

En la cromatografía de papel ascendente, la fase móvil se mueve hacia arriba por acción capilar, opuesta a la gravedad, y los compuestos se separan mediante el principio de cromatografía de partición o cromatografía de adsorción.

• Con un lápiz marcó el punto de partida en el papel.
• Un spotter, como un tubo capilar delgado, se utiliza para detectar en el papel; puede ser un punto muy pequeño de la mezcla de muestra. Seque el sitio de muestra.

Desarrollo del cromatograma:

• El papel se pone en un recipiente cerrado como un vaso de precipitados o una cámara que contiene una pequeña cantidad de la fase móvil. El extremo del papel está por debajo del nivel de disolvente y el punto de partida que se muestra en el papel está por encima del disolvente.
• La mezcla de disolventes aumentará paulatinamente por acción capilar. Los compuestos también aumentarán, aunque su velocidad es más lenta que en la fase móvil.
• Los analitos que poseen una alta solubilidad en la fase móvil y una baja solubilidad en la fase estacionaria están subiendo rápidamente.
• Después de que el frente de disolvente haya llegado a la parte superior de la fase estacionaria, se marca el frente de disolvente y el papel se deja a un lado para que se seque.

• Podemos observar la posición de cada analito sobre el papel si son diferentes en colores. Sin embargo, cuando el analito es incoloro, se utilizan las diversas técnicas para detectar cada analito. Por ejemplo, las reacciones con reactivos productores de color: rociando aminoácidos con reactivo de ninhidrina se pueden producir manchas violetas visibles. O. Si la muestra tiene fluorescencia o absorbe luz ultravioleta, puede verse bajo luz ultravioleta colocándola en un armario UV.

• Calcula las distancias recorridas por la fase móvil y cada analito. El factor de retención resulta útil para comparar los resultados con los de otro.

La cromatografía descendente es un tipo de cromatografía de papel en el que el cromatograma es desarrollado por un disolvente que viaja aguas abajo del papel. La fase móvil fluye sobre la fase estacionaria y se mueve por gravedad. La cromatografía descendente se utiliza tanto en la cromatografía de capa fina como en la cromatografía en papel.

La cromatografía de partición o cromatografía de adsorción es el principio básico de la cromatografía descendente. Funciona según el principio de cromatografía de adsorción y cromatografía para la partición.

• El sistema de cromatografía descendente es el contraste de la cromatografía ascendente. Ésta es una configuración considerablemente más compleja que la cromatografía ascendente.
• El depósito de la fase móvil se coloca en la parte superior del sistema. La cámara desea saturar antes de separar los componentes.
• La observación de la muestra en la cromatografía descendente es similar a la de la cromatografía ascendente. Después de detectar los compuestos, se adjunta papel de adsorción en la parte superior de la cámara.
• La fase móvil viaja lentamente de arriba a abajo en la fase estacionaria. La muestra va con el disolvente y sus componentes se separan.
• La mezcla de muestra aislada se observa sobre papel como manchas después del secado. Los reactivos colorantes se rocian sobre papel para visualizar la mancha o se ven bajo luz ultravioleta.

En la cromatografía de papel, existen dos métodos para separar compuestos: cromatografía de papel ascendente y descendente. Sin embargo, el principio de separación es el mismo en ambas formas. Sin embargo, el principio de separación es el mismo en ambos tipos.

La principal diferencia entre la cromatografía de papel ascendente y descendente es que en la cromatografía de papel ascendente la fase móvil aumenta por acción capilar a través de la fase estacionaria que está en contra de la gravedad, mientras que en la cromatografía de papel descendente la fase móvil fluye sobre la fase estacionaria y se mueve por gravedad.

La cromatografía tanto ascendente como descendente es una técnica utilizada en la cromatografía en papel. En la cromatografía ascendente, para la separación de componentes, el disolvente se mueve hacia arriba por acción capilar sobre la fase estacionaria. En la cromatografía descendente, la fase móvil viaja junto a la gravedad por la que se produce la separación.

Las principales ventajas de la cromatografía ascendente en papel incluyen, que pueden identificarse tanto compuestos orgánicos como inorgánicos, requiere menos cantidad de muestra, es un método económico, en el poco tiempo que separa los compuestos, etc.

Este método no es adecuado para un compuesto con mayor valor de Rf, ya que no tiene una fase estacionaria larga. Otra es que no guarda datos durante largos períodos.

Existen cuatro formas cromatográficas principales. Se trata de cromatografía líquida, cromatografía de capa fina, cromatografía de gases y cromatografía de papel.