La diferencia principal entre la cromatografía en papel y la cromatografía en columna es que la fase estacionaria en la cromatografía en papel es el papel de celulosa y se basa en la adsorción sólido-líquido y la solubilidad del compuesto, mientras que en la cromatografía en columna se utiliza una columna empaquetada con una matriz. como fase estacionaria para separar moléculas. Esta separación se basa en su tamaño, afinidad o carga.
La cromatografía es un método biofísico importante que permite la separación, purificación y detección de los analitos de mezclas complejas para análisis cuantitativos y cualitativos. La cromatografía en papel y la cromatografía en columna se utilizan en la separación de componentes en la cromatografía.
Tabla de contenidos:
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¿Qué es la cromatografía de papel?
La cromatografía en papel es un tipo de método de cromatografía plana en el que se utiliza un pedazo de papel especializado como fase estacionaria para separar los analitos. El principio implicado es la cromatografía de partición, en la que las sustancias se distribuyen o se reparten entre fases líquidas.
Una fase es el agua retenida en los poros del papel de filtro de celulosa utilizado, y la otra es la fase móvil, que se mueve sobre el papel. Durante el movimiento de la fase móvil, los compuestos de la mezcla se separan a causa de las variaciones de su afinidad hacia la fase estacionaria y los disolventes de la fase móvil. Esta fase móvil viaja por los poros del papel bajo acción capilar.
¿Qué es la cromatografía en columna?
En química analítica, la cromatografía en columna es un tipo de técnica cromatográfica para separar un compuesto químico de una mezcla disuelta en un líquido. Separa las moléculas de muestra en función de la adsorción de compuestos, lo que permite separarlas en fracciones a medida que los compuestos pasan por la columna a distintas velocidades.
Este proceso se puede utilizar para purificar materiales que se utilizarán a una escala menor o mayor en futuras investigaciones. Esta técnica es un ejemplo de cromatografía de adsorción en la que la fase estacionaria o adsorbente es sólida. El gel de sílice es la fase estacionaria más frecuente para la cromatografía en columna, seguida de la alúmina.
Diferencia entre cromatografía en columna y en papel:
- La cromatografía en papel se basa en la absorción sólido-líquido, mientras que la cromatografía en columna se basa en la exclusión de tamaño, carga y forma.
- La cromatografía en papel utiliza una hoja de papel de filtro o papel de celulosa especializada como fase estacionaria, mientras que en la cromatografía en columna la fase estacionaria o adsorbente es un sólido (sílice) que se llena en el tubo de vidrio.
- La cromatografía en papel puede llevarse a cabo en una cámara/bote similar a un vaso, mientras que la cromatografía en columna requiere un tubo de vidrio lleno de una fase estacionaria sólida para realizar la separación.
- En la cromatografía de papel, una mezcla de la muestra se aplica en la parte inferior del papel y migra en la parte superior del papel, mientras que en la cromatografía de columna, la mezcla de la muestra se aplica en la parte superior de la columna y viaja por la columna. Para ambas técnicas, la muestra debe disolverse en un disolvente adecuado.
- El disolvente de la cromatografía de papel se mueve por acción capilar, mientras que el disolvente de la cromatografía de columna se mueve con bastante gravitatoria.
- Para realizar la separación, la cromatografía en papel requiere menos disolvente, mientras que la cromatografía en columna requiere una mayor cantidad de sistema de disolventes.
- La cromatografía en papel requiere una cantidad menor de muestras que la cromatografía en columna, que tiene la capacidad de separar una mayor cantidad de muestras.
- Dado que la fase estacionaria de la cromatografía en papel es más corta, la muestra se separa rápidamente, mientras que la cromatografía en columna tarda más tiempo en separar el analito ya que su fase estacionaria es más larga.
- En la cromatografía de papel no podemos controlar la velocidad de separación, mientras que en la cromatografía de columna podemos controlar la velocidad de separación regulando el flujo con un botón.
- La cromatografía en papel no permite recoger la muestra, mientras que la cromatografía en columna nos permite recoger varias bandas en un recipiente separado.
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