La inyección de HPLC es una técnica para inyectar la muestra sin alterar el caudal y la presión del sistema HPLC. La presión de trabajo de una HPLC es suficientemente alta para que no podemos inyectar una muestra en la fase móvil introduciendo una jeringa, por tanto necesitamos un inyector que dé un resultado reproducible y sin interrumpir el caudal y la presión del sistema. Hoy en día, los inyectores de muestras de HPLC se configuran en un rango diferente de volumen para que pueda inyectar el volumen específico que necesite.
Éstos son algunos de los requisitos del inyector HPLC son los siguientes.
- Introduzca la muestra con presión y caudal constantes del sistema HPLC
- Introducir la muestra sin burbujas de aire
- Los volúmenes de inyección de la muestra están en microlitros, por lo que debería ser preciso
- La muestra debe estar libre de partículas
¿Cuántos tipos de inyectores HPLC existen?
Existen tres tipos de inyectores disponibles para sistemas HPLC como Rheodyne, septum e inyector de paro de flujo. Sin embargo, en un sistema HPLC avanzado también se utiliza un autosampler para inyectar automáticamente el volumen preciso de la muestra.
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Inyector de reodina:
El inyector más utilizado es Rheodyne, que es fácil de utilizar con gran precisión y precisión. Según el requisito, el analista puede establecer el volumen del bucle de muestra. Rheodyne tiene dos posiciones de carga e inyección. La posición de carga permite cargar la muestra en un bucle con la ayuda de una jeringa que se utiliza habitualmente para cargar la muestra en el inyector.
Después de una carga de la muestra, la rotación manual del inyector de la muestra en la posición de inyecto permite hacer fluir la muestra a una columna sin burbujas de aire, sin perturbar el caudal y la presión.
Lectura relacionada:¿Por qué necesitamos una solución tampón en HPLC?Inyector septum:
En este sistema, la muestra se inyecta a través del septum de goma. El tabique es una interfaz para inyectar la solución de muestra y se utiliza para sellar el puerto de inyección. No se utiliza habitualmente, ya que el tabique debe soportar altas presiones.
Stop inyector de flujo:
En este tipo de sistema la fase móvil se detiene mientras se inyecta la muestra. La formación de picos fantasma en el análisis del analito es la desventaja de esta técnica.
Inyector de muestreo automático:
Es un inyector automático de muestras que se utiliza para entregar una alícuota de muestra en la columna HPLC. Es un equipo de automatización de alta tecnología con alta precisión, volumen variable y confiabilidad a largo plazo. Consiste en una válvula, una dosificación de muestras y una aguja de muestreo móvil.
Lectura relacionada:¿Por qué se utiliza la elución de gradiente en HPLC?Principio de inyección manual:
En la posición de carga, con una jeringa se llena una muestra en un bucle de muestra. El bucle de muestra se desplaza a la sección de alta presión del sistema HPLC al girar el botón en la posición de inyecto. Normalmente se utilizan válvulas con seis puertos y dos posiciones para la carga y la inyección. La forma más económica de introducir muestras es mediante válvulas de inyección manual.
Varias partes están relacionadas con el inyector del sistema HPLC: válvula de inyección, bucle estirado, bucle empujado, contenedor de muestras, aguja de muestreo, compartimiento de muestras, puerto de lavado de agujas y transductor de presión.
Las preguntas más frecuentes son las siguientes.
¿Qué jeringa se utiliza para inyectar la muestra HPLC?
Se utiliza una jeringa de punta roma de calibre 22 para inyectar una solución de muestra en el bucle de muestra. Normalmente dispone de un pistón de acero inoxidable que se ajusta individualmente al barril de vidrio, esto nos permite utilizar volúmenes de inyección variados.
¿Qué es una inyección en HPLC?
En cromatografía, la inyección es un paso importante. El objetivo es inyectar la muestra a analizar en el HPLC; Por lo general, se dispondrán de dos sistemas de inyección: manual y automático. El volumen del bucle de inyección tiene un impacto significativo en la cantidad de muestra inyectada. Los bucles de inyección varían en tamaño de 1 a 100 µL.