Prueba de Benedict: Principio, Preparación de Reactivos, Procedimiento e Interpretación
Prueba de Benedicto se utiliza como una prueba simple para reducir los azúcares. Un azúcar reductor es un carbohidrato que posee un grupo funcional aldehído libre o cetona libre como parte de su estructura molecular. Esto incluye todos los monosacáridos (p. ej. glucosa, fructosa, galactosa) y muchos disacáridos, incluyendo lactosa y maltosa.
La prueba de Benedict se usa con mayor frecuencia para evaluar la presencia de glucosa en la orina. La presencia de glucosa en la orina es un indicio de diabetes mellitus.
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Los azúcares reductores en condiciones alcalinas se tautomerizan y forman enodioles. Los enedioles son potentes agentes reductores. Pueden reducir los iones cúpricos (Cu2+) a forma cuprosa (Cu+), que es responsable del cambio de color de la mezcla de reacción.
Esta es la base de la prueba de Benedicto. Cuando las condiciones se controlan cuidadosamente, la coloración desarrollada y la cantidad de precipitado formado (óxido cuproso) depende de la cantidad de azúcares reductores presentes.
Composición y preparación del reactivo de Benedict
Se puede preparar un litro de solución de Benedict a partir de 100 g de carbonato sódico anhidro, 173 g de citrato sódico y 17,3 g de sulfato de cobre(II) pentahidratado.
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|---|---|---|
| Sulfato de cobre | 17,3 mg | Proporciona iones cúpricos (Cu++) |
| Carbonato de sodio | 100 gramos | Hace que el medio sea alcalino |
| Citrato de sodio | 173 mg | Forma complejos con los iones de cobre (II) para que no se deterioren a iones de cobre(I) durante el almacenamiento |
| Agua destilada | Hasta 1000 ml | Solvente |
Control de Calidad : La solución de Benedicto es de color azul. Para comprobar la pureza de la solución de Benedict, tome 5 ml de solución de Benedict en un tubo de ensayo y caliéntelo. Si no cambia de color, significa que es puro.
Procedimiento de la prueba de Benedict
- Pipetear 5 ml de reactivo de Benedict en un tubo de ensayo (20x150 mm).
- Agregue 8 gotas de orina al reactivo de Benedict.
- Caliéntelo cuidadosamente sobre la llama de un quemador de gas o colóquelo en agua hirviendo durante 5-10 minutos.
- Enfríe con agua del grifo o colóquelo en un vaso de precipitados que contenga agua del grifo.
- Observe el cambio de color y la formación de precipitados y analice el resultado de la prueba.
Interpretación de los Resultados de la Prueba de Benedicto
El color de la mezcla sirve de guía para la cantidad de azúcar en la orina. Retirar los tubos y examinar la solución en cada tubo para determinar el precipitado y el cambio de color. Indique la concentración de azúcar de la siguiente manera:
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|---|---|---|
| Solución azul | Nulo | |
| Solución verde | < 500 mg / dl | Rastro |
| PPT verde | 500-1000 mg / dl | + |
| PPT amarillo | 1000-1500 mg / dl | ++ |
| PPT Naranja | 1500-2000 mg / dl | +++ |
| Ppt rojo a rojo ladrillo | > 2000 mg / dl | ++++ |
Factores que afectan la prueba de Benedict
Falso positivo también se pueden obtener reacciones si están presentes ciertos fármacos, por ejemplo, salicilatos, penicilina, estreptomicina, isoniazida y ácido p-aminosalicíclico.
Químicos los presentes en una orina concentrada que pueden reducir la reacción de Benedict incluyen creatinina, urato y ácido ascórbico (la reducción es leve).
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