Prueba de Benedict: Principio, Preparación de Reactivos, Procedimiento e Interpretación

La Prueba de Benedict es un método que se utiliza para reducir los azúcares(carbohidratos). Un azúcar reductor es un carbohidrato que posee un grupo funcional aldehído libre o cetona libre como parte de su estructura molecular. Esto incluye todos los monosacáridos (p. ej. glucosa, fructosa, galactosa) y muchos disacáridos, incluyendo lactosa y maltosa.

La prueba de Benedict se usa con mayor frecuencia para evaluar la presencia de glucosa en la orina. La presencia de glucosa en la orina es un indicio de diabetes mellitus.

Principio de la Prueba de Benedict

Los azúcares reductores en condiciones alcalinas se tautomerizan y forman enodioles. Los enedioles son potentes agentes reductores. Pueden reducir los iones cúpricos (Cu²⁺) a forma cuprosa (Cu⁺), que es responsable del cambio de color de la mezcla de reacción.

Esto es en lo que consiste el test de Benedict. Cuando las condiciones se controlan cuidadosamente, la coloración desarrollada y la cantidad de precipitado formado (óxido cuproso) depende de la cantidad de azúcares reductores presentes.

Composición y preparación del Reactivo de Benedict

Se puede preparar un litro de solución de Benedict a partir de 100 g de carbonato sódico anhidro, 173 g de citrato sódico y 17,3 g de sulfato de cobre(II) pentahidratado.

Control de Calidad : La solución de Benedict es de color azul. Para comprobar la pureza del reactivo de Benedict, tome 5 ml de solución, trasbase a un tubo de ensayo y caliéntelo. Si no cambia de color, significa que es puro.

Procedimiento de la prueba de Benedict

1. Pipetear 5 ml de reactivo de Benedict en un tubo de ensayo (20x150 mm).
2. Agregue 8 gotas de orina al reactivo de Benedict.
3. Caliéntelo cuidadosamente sobre la llama de un quemador de gas o colóquelo en agua hirviendo durante 5-10 minutos.
4. Enfríe con agua del grifo o colóquelo en un vaso de precipitados que contenga agua del grifo.
5. Observe el cambio de color y la formación de precipitados y analice el resultado de la prueba.

Interpretación de los resultados de la reacción de Benedict

El color de la mezcla sirve de guía para la cantidad de azúcar en la orina. Retirar los tubos y examinar la solución en cada tubo para determinar el precipitado y el cambio de color. Indique la concentración de azúcar de la siguiente manera:

Factores que afectan el ensayo de Benedict

Falso positivo también se pueden obtener reacciones si están presentes ciertos fármacos, por ejemplo, salicilatos, penicilina, estreptomicina, isoniazida y ácido p-aminosalicíclico.

Químicos los presentes en una orina concentrada que pueden reducir la reacción de Benedict incluyen creatinina, urato y ácido ascórbico (la reducción es leve).